全球新冠肺炎确诊人数已突破230万,面对复杂的国际疫情形势,防控依然严峻,“外防输入,内防扩散”仍然是未来一段时期的重要工作,复工、复产、复学带来的潜在风险也不容小觑,所以新冠肺炎核酸和特异性抗体检测工作仍将持续,由于这两种方法的检测原理完全不同,因此在临床分析中应充分考虑方法学引入的问题,本文就核酸和抗体检测做一简单阐述,以期为临床提供诊疗思路。 检测原理 核酸:多数采用荧光定量PCR方法。检测原理是以病毒独特的基因序列为靶标,通过PCR扩增,使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与预先加入的荧光标记探针结合,产生荧光信号,扩增出来的靶基因越多,累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中,由于没有靶基因扩增,因此就检测不到荧光信号增强。所以,核酸检测,其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。 抗体:抗体是机体免疫细胞被抗原激活后,由分化成熟的B细胞(即浆细胞)所合成和分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。抗体可分为五类:IgM、IgG、IgA、IgE和IgD,其中临床主要检测的是IgM和IgG抗体。IgM抗体多在发病3~5天后开始出现阳性,1-2周达峰值,随后逐渐降低。IgG抗体则晚于lgM出现,发病4周左右达到峰值,并维持较长时间。 检测方法 核酸:实时荧光RT-PCR检测 抗体:化学发光法、酶联免疫法、胶体金法 优缺点 核酸检测: 优点:核酸检测的阳性预测值可达100%,也就是说核酸检测的假阳性率极低。 缺点: 1、采样部位影响检测结果,新冠病毒在下呼吸道及肺部病毒载量最高,进行咽拭子采样可能导致假阴性结果的出现。 2、采样时机影响检测结果,患者出现症状后第一周内唾液病毒载量最高,其后随着时间,病毒载量逐步下降; 3、采样人员的技术直接影响检测结果; 4、试剂的质量影响检测结果。 抗体检测: 优点:具有采样方便(静脉血)、检测效率高(检测周期短)的特点; 缺点: 1、抗体检测的窗口期问题(病毒进入机体到机体产生特异性的抗体需要一段时间); 2、不同试剂厂家检测试剂盒的灵敏度不一,抗体靶点不同可能出现结果不一致的情况; 3、血液标本中的某些干扰物质可能导致抗体检测的假阳性、假阴性的问题。 4、抗原交叉反应对新型冠状病毒血清特异性抗体检测的影响问题。 结果判读
我们怎么选? 随着疫情的发展,多次核酸检测阴性,但最终被确诊为新冠肺炎的患者出现,以及症状完全缓解的患者在核酸检测阴性后再次转为阳性等,提示除核酸检测外我们应该选择更多的检测方式进行互补,通过以上分析我们可以看出核酸检测是病毒存在的直接证据,而抗体检测则是间接证据,但两种方法同时存在其优缺点,有研究资料显示,病毒载量与血清抗体反应成反比,因此血清抗体检测可以作为核酸检测的有益补充,在决定感染控制措施时应同时考虑连续的病毒载量监测和抗体反应。所以核酸与抗体结合检测更占优势。 |
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