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体内外寄生虫检查方法大全

 一掬飘雪 2020-05-02

粪便检查是诊疗过程中最常见的实验室检查之一。制备和阅读检查结果所需的技术都是很简单的,也是每个医师都要会的。尽管简单,但这些检查结果及随后的治疗往往决定动物康复的情况。

01

采集、处理、储存与运输

采集

(1)样品尽可能新鲜,因为排出体外后虫卵会快速孵化。

(2)饲主应该目睹动物排便,确保新鲜并观察有无任何染色、新鲜血液或其他问题。

(3)新鲜样品如果2h内不检查应冷藏保存,且不能超过24h。

(4)提供的检测量相当于成年男性的拇指大小,至少10g。

(5)样品应标明动物的名字、号码、采集时间以及是否冷藏过。

常规处理

(1)样品应认真处理,以免造成人为污染。

(2)保持清洁的实验室检查环境。

(3)保存清晰的操作记录。

储存

(1)可使用无菌取样袋、小塑料夹层袋、塑料容器或实验室一次性手套(把里面翻出来)贮存粪便。

(2)样品可以无限期地储存在10%的福尔马林中(1份粪便+9份福尔马林),局限性较小。

(3)样品不能冷冻储存,不能用70%酒精或100%甲醇储存。

运输

(1)样品应在冰箱中放置到4℃,然后包裹在冰上或冰袋上24~48h。

(2)将重要样品装入单独的塑料袋中,以免样品液体泄漏。

02

内寄生虫检查方法

大体检查

用途

黏稠度

颜色

血液、黏膜或寄生虫成虫

技术

直接用肉眼检查粪便或呕吐物

备注

肉眼检查不到(如潜血)要使用其他检查方法

直接涂片:湿法制片

用途

原虫(如贾第鞭毛虫)

寄生虫荷量(隐孢子虫)

细菌(如螺旋体、弯曲杆菌)

技术

1、在载玻片上滴1滴盐水或水后,加上等量的粪便。充分混匀粪便和水,在载玻片上涂抹制成一层薄膜。

2、移除任何大块粪便,盖上盖玻片以待检查。

3、先在10倍镜下检查寄生虫卵,40倍镜下检查原虫,100倍镜下检查细菌。可以从盖玻片一侧滴加染色剂,以便更清楚地鉴定。

备注

1、没有虫卵变形。

2、没有一种浓缩技术(小样本)会导致低数目。

3、活力可以成为一个有用的辅助诊断。

直接涂片:干法制片

用途

原虫(如贾第鞭毛虫)

寄生虫荷量(隐孢子虫)

细菌(如螺旋体、弯曲杆菌)

技术

1、在玻片上放小量的粪便,使用涂药棒将其薄薄散开。

2、加热固定,使用Diff-Quick染色。

3、先在10倍镜下检查寄生虫卵,40倍镜下检查原虫,100倍镜下检查细菌。

备注

1、没有虫卵变形。

2、没有一种浓缩技术(小样本)会导致低数目。

3、不能判断寄生虫的活力。

标准或简单的:浮集法

用途

大多数寄生虫

寄生虫荷量

技术

1、将1~2g粪便放进合适的容器(如纸杯),添加悬浮液。

2、用压舌板充分混匀,使用茶滤网或棉布过滤到第二个容器中。

3、将混合物倒入检测管,继续添加悬浮液直到凹液面形成。

4、在凹液面上放置一盖玻片10~15min。

5、取下盖玻片,放在载玻片上进行检查。

备注

1、可用商品化的粪便悬浮液试剂盒。

2、收集虫卵的效果比离心浮集法差。

3、因为重力作用,幼虫沉降而检测不到。

离心浮集法

用途

大多数寄生虫

寄生虫荷量

技术

1、取1茶匙粪便放进纸杯,与充足的水或悬浮液混合制成半固体悬浮液。

2、在第二个纸杯上放置茶滤网或棉布,清空上面的内容物。

3、用压舌板按压液体通过滤网,随后丢弃固体废物。

4、将过滤后的混合物倒入15mL的离心管。

5、用悬浮液填充满离心管,形成一个轻微的凸液面;不要加过多悬浮液。

6、在离心管顶部放一盖玻片。

7、将离心管平衡后离心,1 300 rpm 离心5min。

8、取出离心管,静置10min。

9、直接向上提起盖玻片,放在载玻片上。

备注

1、收集虫卵要比标准浮集法更有效。

2、需要一个能容纳15mL离心管的水平转子离心机。

3、因为重力作用,幼虫沉降而检测不到。

贝尔曼技术

用途

线虫幼虫

技术

1、用温水或生理盐水(30℃)装入漏斗以覆盖网筛。

2、放一块棉布或纱布覆盖住漏斗内的网筛。

3、在棉布上放5~15g的粪便、土壤或组织样品,将伸出的棉布盖到样品

表面。确保样品被温水覆盖。

4、让样品静置过夜(>8h)。

5、取一张玻片,放在被截断的吸管下面,滴一滴液体到玻片上。

6、盖上盖玻片并检查。如果检查结果呈阴性,重复多张载玻片以保证结

果准确。

备注

可以有效地收集幼虫

粪便培养

用途

钩虫幼虫

区分有相似外观的虫卵和孢囊的寄生虫

技术

1、将粪便放入用0.1%的NaHCO3溶液冲洗的玻璃罐中或放在垫有滤

纸的培养皿中。

2、盖上容器并放置到黑暗的地方7~10d。容器内要保持足够的湿度

以产生液滴;如果没有液滴,加入少量的水。

3、7~10d后,使用少量的水冲洗容器,收集液体并离心。

4、在显微镜下检查沉渣。

备注

保证鉴定

湿涂片 / 粪便培养 InpouchTM

用途

胎儿三毛滴虫

技术

遵照制造商的说明

从包装盒中取出袋子,并确认在上面腔室有1mL液体。打开袋子,将带有0.03g新鲜粪便的涂药棒或棉签插入上面腔室中的液体中。在拇指和食指间以及腔室壁上轻轻摩擦将粪便留在里面。密封袋子做好标记。

湿涂片

将袋子口朝上静置15min,使胎儿三毛滴虫集中在袋子底部。将观看夹水平横跨袋子,随后将袋子摊放在显微镜下检查,要特别注意检查袋子边缘。

粪便培养

将所有的液体挤压进入下面的袋子,密封袋子,培养 18~24h。抓住袋子边缘,将其上下颠倒3~4次混匀。将观看夹水平横跨袋子,随后将袋子摊放在显微镜下检查。

备注

1、过多的粪便将导致培养基呈云雾状而无法识别。

2、如果没有检查到胎儿三毛滴虫,连续查看2~4d,然后隔天查看到12d。

3、1~10个虫体足会导致预期的阳性试验·粪便培养往往比湿涂片更准确。

03

外寄生虫检查方法

大体检查

用途

虱子、螨、蜱虫、苍蝇或跳蚤

技术

在动物体表看到外寄生虫或用跳蚤梳后看到

备注

仅有有限的寄生虫可以看到

透明胶带

用途

虱子或螨

技术

1、将透明胶带黏面朝外弯曲成一个环。

2、在动物皮肤上按压胶带。

3、在玻片上滴1滴水,将胶带黏面朝下放在水上并按压。

4、显微镜下检查。

备注

仅有有限的寄生虫可以看到

显微镜检查

用途

大多数外寄生虫

技术

1、在玻片上滴一滴矿物油。

2、在矿物油中滚动棉签或采集的样品以收集所有的碎片。

3、在玻片上盖上盖玻片,显微镜下检查,使用4倍镜。

备注

外寄生虫诊断最彻底的技术

原创作者:张超

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