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一 校正图片的光密度 1.校正图片的光密度
2.新建一个新的校正参数
3.单击image后，出现弹窗后，鼠标单击图片空白处背景（一般数值应该在230左右），点击ok。
4.命名，然后点击system。
二 测量参数的设置 1.下图第3步，除了选中IOD,应同时选上area（左侧选上area，IOD即可），通过调节area的范围，分析时可以很好的剔除面积很小的点（一般IOD的范围不用改变）。
2.option 选项需要设置的有轮廓样式（根据图片选择），是否剔除边界的染色（一般选择none），以上设置好后，点击ok。
3.下图第5步选中后，直接鼠标点击染色部位（我一般从深到浅）至染色部分全部选中。按照步骤保存好方法后，点击close 然后直接点count。
三 1. 保存好设置好的方法后，接下来，按照前面的步骤，直接file→load file刚才保存的方法进行count就行了。
2.查看分析结果、导出结果。（点击view-statistics就能出现结果） 注： （1）点击file后可出现数据结果导出路径； （2）如果分析的组织是占满整个图片，直接看总的IOD值就行了。若不是，我们还应计算目标的面积，然后用IOD/area，这样得到的结果才更加的准确。
Tips 1. 拍摄时，光源亮度、曝光时间应一致（不要使用自动曝光）。 2. 拍照前，应在空白背景处进行白平衡校正。（个人观点：拍照时尽量让照片整体亮一点，每次我显微镜的专业软件拍完照片后，觉得挺好的，但是放PPT上或分析时一看整体有点暗。） 3. 专业相机拍照时，应保存TIFF格式（TIFF是一种灵活的位图格式）。 image-Pro plus（IPP）是一种专业的图像分析软件 IPP能随意对图象切割、测量、计数、分类（材料学粒子粒径测量，生物学细胞或组织大小测量等）；HE等染色方法的阳性灰度、阳性比例计算；简单电泳条带分析；荧光强度分析等。可以选择面积、周长、角度等50多种测量方式。 图像分析方面： IPP能够荧光共位性分析；空间和灰度校对；将测量结果以统计值、单个测量值、三维浓度图和线形等方式输出，并可以将测量结果输出到EXCEL中处理。 而上文提到的免疫组化结果处理仅是其众多应用中的一种，希望大家可以充分的利用这个工具，更好地处理自己的科研结果。 |
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