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摘要: 作者：程唯佳单位：长江航运总医院全球新冠疫情肆虐之际，这个没有硝烟的战场打乱了所有人的生活。在疫情爆发初期，病毒核酸检测作为唯一的确诊指标，遭到各种困难和各界的质疑。现在国内疫情得到很好的控制，普通人 ... 作者：程唯佳 单位：长江航运总医院 全球新冠疫情肆虐之际，这个没有硝烟的战场打乱了所有人的生活。在疫情爆发初期，病毒核酸检测作为唯一的确诊指标，遭到各种困难和各界的质疑。现在国内疫情得到很好的控制，普通人群复工复产的需求迫在眉睫，病毒的筛查指标五花八门，让人无所适从。那我们来逐步了解一下各种检测方法到底是怎么回事吧。目前新型冠状病毒的检测方法主要集中在核酸和抗体检测上。核酸检测是目前新型冠状病毒检测的“金标准”，具有早期诊断、灵敏度和特异性高等特点；而抗体检测作为核酸检测的补充手段，具有操作便捷、检测迅速的特点。
目前临床上最常用的方法是荧光定量PCR。简单来说，该方法就是用一段含有新冠病毒特有信息的探针去患者采集的标本里寻找相应的序列。能够找到，代表检测阳性；没有找到，检测为阴性。为了避免错误，通常至少要选择至少两个探针，两个探针都检测到了或者同一个探针检测两次都阳性才能确认SARS-CoV-2病毒核酸阳性。
检测程序需要经过四个步骤，采样、灭活、核酸提取、上机检测。首先根据试剂盒说明书进行标本采集，标本类型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液等。检测机构收到标本后，对标本进行56℃水浴灭活30分钟。之后是核酸提取，核酸提取常用的方法有磁珠法、离心柱法、煮沸裂解法、一步裂解释放法等。最后是荧光PCR核酸检测，也就是上机器检测，将提取物进行荧光PCR扩增反应，需要约2个小时。
一批标本从采样到最后出具检验报告需要经历6个多小时，所以各位要检测核酸的朋友们，再催也没有用，实在是没有办法更快啦。
新型冠状病毒肺炎发病3~5d后，血清特异性抗体逐渐产生。首先出现的是免疫球蛋白IgM抗体，约在5~7天产生；然后出现IgG抗体，约在10~15天产生。通常情况下，IgM 抗体产生早，一经感染，快速产生，维持时间短，消失快，血液中检测阳性可作为早期感染的指标。IgG 抗体产生晚，维持时间长，消失慢，血液中检测阳性可作为感染和既往感染的指标。因此，通过检测患者血清中 IgM 和 IgG 的阳性情况，有助于临床医生判断患者所处病毒感染的不同时期。《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第七版）》明确将抗体检测结果纳入确诊病例的诊断标准，以及疑似病例的排除标准。如果疑似病例血清特异性IgM和IgG抗体阳性，IgG抗体由阴性转为阳性或恢复期较急性期有4倍及以上升高，则可以诊断其感染了新型冠状病毒。疑似病例的排除标准，需要同时满足病毒核酸检测结果阴性，以及发病7 天后新型冠状病毒IgM和IgG抗体仍为阴性两个条件。目前临床中常用的抗体血清学检测方法有3种：酶联免疫吸附试验法、化学发光免疫分析法、胶体金免疫层析法。而应用最广泛的是胶体金免疫层析法。该方法操作简便，无需任何仪器设备，操作者、操作空间不受任何限制。与抗体血清学检测相比，核酸检测能够检测到处于窗口期的患者，及早发现感染者，是新型冠状病毒检测的“金标准”，但是对检测设备或平台要求较高，高灵敏度的RT-PCR仪价格昂贵，对实验室的洁净度和操作人员要求也较高。此外，核酸检测耗时较长，考虑到样本运输、样本积压的情况，通常最快24小时才可以报告结果。与核酸检测相比，抗体血清学检测的血液标本更易获取且标本质量有保证、操作简单快捷、很大程度上降低了医护人员在标本采集和检测过程中被感染的风险、更易于基层实验室展开筛查工作等。如果说核酸检测病毒的核糖核酸（RNA），是病毒存在的直接证据，那么抗体检测的就是患者血液中被刺激产生的抗体，是间接证据，对临床有提示作用。当核酸检测阴性时，将IgM和IgG抗体检测增加进去，可以弥补核酸检测容易造成漏诊的缺点。抗原进入机体需经过一定的潜伏期才会产生IgM与IgG。在这一期间，血清无法检出IgM与IgG，核酸检测能检测处于窗口期的患者是否受到感染。而抗体检测在取样过程和检测时间等方面都有核酸检测无法相比的优势。根据中国官方文件的建议，核酸检测用于检测是否受试者携带病毒，而抗体检测用于核酸检测结果阴性的疑似患者补充检测或者联合核酸检测。一个用于疾病的鉴别诊断，确保“不错”，一个用于疾病的初筛，确保“不漏”。因此在实际检测过程中需要二者联合检测，综合判读，提高病毒携带者的阳性检出率，减少社会传播的风险。 |
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