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一．危害马铃薯生长发育的病毒 危害马铃薯生长发育的病毒有30余种，其中我国普遍存在并危害严重的有：马铃薯卷叶病毒（PLRV），马铃薯Y病毒（PVY），马铃薯X病毒（PVX），马铃薯A病毒（PVA），马铃薯S病毒（PVS），及马铃薯纺锤块茎类病毒（PSTV）等六种病毒或类病毒。 二．茎尖脱毒技术 1．茎尖脱毒种类： 目前应用最广泛的而且在农业生产和商业生产取得巨大成功的植物脱毒技术是植物技术中的茎尖分生组织培养脱毒技术。也就是马铃薯脱毒种薯中常说的“茎尖脱毒”。它是根据病毒在植物体内分布不均匀和茎尖组织带毒少的原理，结合使用钝化病毒的热处理方法，通过拨取茎尖分生组织进行培养获得的植株。
此表取于《马铃薯大全》155页 2．脱毒材料的选择： 田间株选要注意几个方面事项：所选的植株必须表现典型的本品种特性的植株，符合准备脱毒品种的特征，包括株型，叶形，花色等植物学性状及成熟期等农艺性状；植株生长健壮，无明显病毒性，真菌性，细菌性病害的症状；单株产量和大薯率高；适时早收。收获后再对薯块细选符合品种特性的薯块，包括皮色，肉色，薯形，芽眼等，无病斑，虫蛀和机械创伤的大薯作为脱毒材料。由于PSTV在目前用植物茎尖分生组织方法很难脱掉，在进行茎尖剥离脱毒之前，应先对入选的块茎进行PSTV检测，淘汰带有PSTV的薯块，以免前功尽弃。 3．脱毒材料表面消毒： 入选的材料用1﹪的硫脲+5毫克/升赤霉素浸种5分钟，以打破休眠。用湿润沙覆埋，置于25℃黑暗条件下催芽。待薯块顶芽生长到2厘米时，取芽作为外植体用于茎尖脱毒。从打破休眠并完成催芽的块茎上用刀片切取2—3厘米的顶芽，在超净工作台内进行表面消毒处理。消毒方法是：先将芽在75﹪的酒精中过一遍（几秒钟），然后用饱和漂白粉上清液或用次氯酸钠溶液稀释为5﹪—7﹪，浸泡15—20分钟，然后用无菌水清洗3—4次。消毒完的材料置于封口的无菌瓶中。 4．拨取茎尖组织： 取经处理好的茎尖，以无菌镊子固定，在30—40倍解剖镜下进行分生组织剥离。用解剖刀小心的除去茎尖周围的叶片组织，暴露出顶端圆滑的生长点，用解剖针细心切取所需的茎尖分生组织。一般切取茎尖的长度为0.1—0.3mm，带有1—2个叶原基。 5．马铃薯茎尖分生组织培养的培养基： 以MS+赤霉素0.1毫克/升+6-苄基腺嘌呤0.1毫升/升+D-泛酸钙0.2毫克/升+蔗糖2﹪，琼脂0.6﹪，PH=5.8，为比较好的培养基组合，其他的见下表： 6．经过茎尖脱毒后的材料必须要进行病毒检测和田间试种后，确定材料不带病毒后才可以进行快繁。 第二部分 马铃薯试管苗工厂化生产技术
了减少洗涤剂对人手的伤害，最好用家用洗碗的洗涤净。洗涤时要先将要洗的器具放入清水中浸泡一段时间，然后清去器皿中的污物，之后泡入含有洗涤剂中的水，用鬃刷将器皿内外刷洗干净，于水头下把洗液全部冲洗掉，最后用蒸馏水淋洗一遍。新购置的玻璃器皿一般都游离的碱性物质，使用前要用1﹪盐酸溶液中浸泡一昼夜后清洗。洗后的器皿应透明锃亮，内外水膜均一，不挂水珠。洗涤后的器皿应置于控水架上沥水晾干。洗涤移液管，吸管等管状器皿时，先将移液管等浸泡于含有洗涤剂的洗液中2小时以上，然后用流水冲半小时，再用蒸馏水冲洗一遍，甩去管内水，放入烘干箱内烘干。 2.接种室管理注意事项： 接种室也叫无菌操作室，是进行试管苗继代培养的场所，是试管苗生产中关键的地方，它关系到试管苗的污染率和接种工作效率等。接种室要干燥，干爽，清洁，明亮。在进口处应有缓冲间，用于进入接种室前更衣换鞋。缓冲间要按有紫外线灯用于空气灭菌。接种工作在超净台上进行。超净工作台使用时间过长过滤会堵塞，一般低效过滤器每半年清洗一次，高效的视情况3—4年更新一次。
7．马铃薯种质试管苗的保存： 试管苗的保存是用维持最低生长速度来实现的，种质试管苗经一定时间的保存，需要时即可繁殖。使试管苗生长缓慢，或几乎不生长的方法很多，大体分为两种：一，在培养基里加入生长延缓剂；二，控制生长条件，如降低温度，改变培养器中的空气成分或培养基营养成分，以及提高培养基的渗透压等。甘露醇是一种在代谢中不活跃的蔗糖乙醇，用它调节培养基中的渗透压，抑制植株对水分的利用，可以达到减慢生长的目的，培养瓶中加入4﹪—5﹪的甘露醇10℃，500—1000勒克司条件下可以保存11个月以上。B9是一种生长延缓剂，可以抑制植株生长，培养基加50mg/L，B9可以使马铃薯茎段苗保藏存活近两年。培养基加入50—70mg/L甲基丁二酸也可以延缓试管苗生长，但效果不如甘露醇和B9。降低保存温度可以延缓植株生长，无论是在培养基中加甘露醇还是甲基丁二酸，试管苗的存活率随保存温度的降低而提高。适当减少光照强度，缩短光照时间能延缓试管苗生长，但光照强度过弱不利于试管苗长期保存，500—1000勒克司的光照强度较为适宜。试管封口材料的透气性影响培养基的蒸发速度，从而影响保存效果，用铝箔封口的管内培养液可以保存2年，试管苗生长良好。同时降低温度也是关键因素。 第三部分 马铃薯微型薯工厂化生产技术 一．微型薯概念 在防虫温（网）室内人工合成基质中，通过试管苗移栽，试管薯栽培或茎段扦插，生产直径1—10厘米的小型薯块，称为微型薯（Minituber），微型薯生产是将无土栽培技术，植物组织培养技术及扦插快繁技术想结合，大规模，高标准生产马铃薯种薯的新技术。 二．基础苗移栽前的壮苗培养 目前脱毒微型薯生产一般是以脱毒试管苗扦插基础苗，将试管苗切成带有一个芽的茎段接入生根培养基（生根培养基：1/2MS无机盐+吲哚乙酸0.2mg/L+食用白糖2﹪+琼脂0.7﹪，PH值5.8）每天16小时光照,25℃条件下培养一周,小苗长成带有4—5片叶及3—4条小根时，打开培养瓶封口，置于温室锻炼2天。移栽时取出试管苗用自来水将培养基冲洗干净，即可移栽。在温湿度合适的条件下移栽成活率可达到95﹪以上。 三．苗床准备 1．基质处理：将漂洗的蛭石和珍珠岩按1：1体积混合，边混合边用1﹪的甲醛溶液进行喷洒消毒；拌匀后盖上塑料薄膜，在太阳下晒7天左右；最后接掉薄膜，放置2—3天待用。 2．苗床铺设：用砖砌宽120厘米，深12—15厘米的栽培槽，长以温室跨度而定，周围的砖缝留有溢水口，以便多余的水及时排出槽外，畦底先铺一层薄膜，然后将混合后的基质装入槽内，薄厚均匀，厚度为10厘米，刮平后用清水浇透（手握成团，不滴水为宜），待基质温度提高后即可移栽。 四．脱毒试管苗的选择 成活率与试管苗的苗龄有密切关系。苗龄过长生理活性若，缓苗时间长，不仅成苗率低，同时也使微型薯产量下降；苗龄过小，每苗可利用的茎节数少，不利于降低成本。因此，生产微型薯宜选用苗龄35—50天，生长健壮、无污染、节间短、叶片多的脱毒试管苗，扦插成活率高、微型薯数和单株重都高，能有效利用脱毒试管苗。 五．脱毒试管苗扦插前的管理 1．脱毒试管苗的锻炼：在培养室中生长的试管苗叶片表面没有蜡质层，不适应外界环境，直接扦插容易失水而萎蔫致死，因此在扦插前3—5天打开试管苗封口膜，关闭培养架上的电灯，降低室内温度在16—18℃之间，进行试管苗锻炼，提高扦插的成活率。 2．脱毒试管苗切段及生根处理：为了提高繁系数，降低生产成本，可以采用试管苗茎段剪切后进行扦插。先用75﹪的酒精或0.1﹪的高锰酸钾溶液对镊子、剪刀、盘子进行消毒处理，然后将经过锻炼的试管苗用剪刀从基部剪断，再用镊子小心的取出，剪成带2叶1心或3叶1心的茎段，用生长调节剂20mg/LGA3+30mg/LNAA浸泡30s左右，进行生根处理，然后平放在消毒盘内待栽。 六．脱毒试管苗切段扦插 将处理后的试管苗茎段按行株距10㎝×5㎝，用镊子直接插入基质中，密度为180—220/㎡。扦插深度以露出1叶1心或2叶1心为宜。这样扦插既有利于生根，又有利于苗子尽早成活生长。扦插后一次性浇足定根水。 七．苗床管理 扦插苗缓苗期、营养生长期、小薯生长期三个阶段所需要不同的温度、光照、水肥条件，因此在不同的时期要采取相应的管理措施。 1．光、温管理：在早春寒冷季节，室温过低时，试管苗扦插后应盖上薄膜以提高基质温度，白天温度在25—28℃，夜间温度不低于15℃，并且加盖遮阴率70﹪的遮阳网或草席，减少光的照射强度。大约7天以后，苗子即可成活，试管苗缓苗期，如果掌握好温度、湿度、遮阴三个环节，苗子成活率达到98﹪，做到及时补苗。待苗子生根开始生长后，可揭去薄膜和遮阳网，增加光照，培育壮苗。在营养生长阶段，要求持续稳定的温度，温度过高或过低都不利于苗子生长，并且昼夜温差不要求大。调节温度的方法是：低温时节，及时覆盖草毡防寒保温；高温时节，通过开窗通风、喷水冷却、盖上遮阳网降温、减少光的照射。白天的温度应保持在20—25℃，夜间15—18℃。并且加盖呢绒网纱防蚜虫。在生长进入结薯阶段后与扦插苗营养生长阶段不同，昼夜温差较大、温度较低、短日照更有利于结薯，这时温度应控制在15—25℃为宜，同时可以适当遮荫以减少日照时数，促进结薯。 2．水、肥管理：湿度是影响扦插成活、生长的限制因子之一。试管苗扦插后，立即浇一次透水，生根之前相对湿度不应低于90﹪，每天随时观察，保持基质湿润，根据具体情况，采用喷雾法洒水，一般2天洒一次清水，在上午8点前，下午5点后洒水为宜。待苗子生根后开始生长时，喷施改良MS营养液或0.2﹪磷酸二氢钾和0.2尿素混合营养液，一次清水，一次营养液，前20天，每3—4天喷一次，以后每隔6—7天喷一次，以促进根茎叶的生长，相对湿度保持在60—70﹪为宜。植株进入现蕾期开始结薯时，行间开沟补施1—2次三元复合肥120克/㎡；或施撒可富60克/㎡，尿素40克/㎡，有徒长现象时，叶面喷施0.2﹪薯块膨大素，能抑制地上部分的生长，增加结薯数量和百粒重。基质保持潮湿为宜。 3．适时培土（基质）：随着苗子的生长，及时陪基质以促进结薯。当植株长到8—10厘米时，进行第一次培土（蛭石和珍珠岩混合基质）；植株长到15—20厘米时，进行第二次培土（基质）这时可把植株基部弯曲压入蛭石中，以增加结薯层，获得较高的产量。 4．病虫害防治：病虫害的防治坚持“预防为主，综合防治”的原则。 病害：由于温室的湿度较大，晚疫病极易发生，因此，在马铃薯的整个生育期，以晚疫病防治为主。在晚疫病发生之前，提前喷药预防，可用25﹪的瑞毒霉可湿性粉剂500—800倍液或50﹪甲霜铜的500倍液喷雾2—3次，每10—14天喷一次。如发生中心病株，及时挖出远距离掩埋，并且立即用瑞毒霉、甲霜铜交替喷雾（浓度同前），以后每7天喷一次，直至控制住病害为止。在整个生育期，可喷洒农用链霉素2—3次，浓度为10—20mg/L，防止细菌性病害的发生。 虫害：蚜虫是危害马铃薯的主要虫害，它是马铃薯传播病毒的主要媒介，为防止病毒再侵染，保证微型薯质量，必须以预防为主，试管苗扦插后，可用40﹪的乐果乳油配成2000倍液喷雾一次，连续喷2—3次可防治蚜虫危害。由于温室系统简单、脆弱，易造成潜叶蝇的大量发生，应随时观察，发现后立即喷药防治。可用斑潜净20﹪乳剂2000倍液喷雾，效果明显。 八．收获与贮藏 试管苗茎切段温室生产的微型薯，根据不同品种，从扦插到成熟需60—90天，一般成熟标志是茎叶变黄、枯萎。收获时，应先与一周前停水，拔除地上枯株，将基质倒入筛内，筛去基质，将收获的小薯块先放在通风良好的、有散射光的室内，经3—5天薯皮干燥、坚实后，剔除病、伤、烂薯，按大小分三级：一级，﹥5克；二级，2—5克；三级，﹤2克，分别装入网袋，标明品种名称、级别、收获日期，然后放于通风、有散射光、控制温度在2—4℃，湿度在85—90﹪，清洁、经消毒处理的条件下贮藏为宜。 |
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