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mRNA 纯化包方案-针对新冠疫苗研发

 上海精瑞科学 2020-07-10

新冠疫情爆发以来,全球都付出了巨大的代价,热门药物效果欠佳的现状,让人们更是寄希望于疫苗的研发。

在这场全球新冠疫苗研发的竞赛上,病毒载体疫苗和核酸疫苗(mRNA 疫苗和 DNA 疫苗)两类新型疫苗的研发数量不仅超过了总数的一半以上,研发进展也一直卓越。

而核酸疫苗中的 mRNA 疫苗,更是以其更低的成本、更高的有效性和安全性、以及可快速量产的优势,强势 C 位出道,成为新型疫苗中的全能担当。

今天就让一款 mRNA 的新型纯化工具包,即从亲和到反相的最全色谱工具包,带你在疫苗研发的舞台上乘风破浪!


关于 mRNA 及整体柱
mRNA 具有大分子质量,也对剪切力敏感。
整体色谱柱的大通道结构允许大分子自由进入,并且层流可防止剪切力损伤。
整体柱结构能够纯化高达 10 kb 或更大的 mRNA。


mRNA 丰富的化学性质是纯化色谱柱多样化选择的基础。
mRNA 含有带电的磷酸酯主链和具有氢键能力的疏水核苷酸残基。

电荷相互作用,氢键和其他分子作用力也带来了挑战。
mRNA 充当成核中心,并容易与IVT混合物中的其他组分形成缔合。
这些杂聚体降低了传统已知纯化方法(包括过滤,沉淀和色谱法)的容量,回收率和纯化能力。

BIA Separations 可以提供,专用于大分子纯化的创新型层流设计整体柱,mRNA 纯化工具包,灵活、快速、方便地使用整体色谱柱,以获得您所需的高质量产品。

工具包概述


CIM 技术提供了功能独特的纯化工具包,可用于快速过程开发和规模扩大:

  •  产品具有完整的 poly(A)尾

  •  dsRNA 和 DNA template 被去除

  •  去除了与过程和产品相关的杂质,如酶、DNA 和 RNA 片段


一、CIMmultus Oligo dT
提供了 mRNA 的一步亲和捕获。
通过氢键结合,oligo dT 与目标物的末端 poly(a) 序列形成稳定的杂化结合。
样品上样期间,非 RNA 污染物流穿色谱柱。

二、CIMmultus C4 HLD
是疏水性层析整体,用于纯化核酸。
样品以高离子强度应用于沉淀 RNA 的盐中。
大多数 DNA,dsRNA 和 short transcripts 的洗脱时间要早于完整的 ssRNA。
通常通过 NaOH 清洗步骤洗脱蛋白质和聚集体。

三、CIMmultus PrimaS
在室温和水相条件下纯化大单链 mRNA(ssRNA)。
可以用于抛光或高分辨率捕获方法。
可以去除 dsRNA,DNA,蛋白质和内毒素,同时按大小递增的顺序对 ssRNA 进行分级分离。


四、CIMmultus SDVB
是用于纯化 ssRNA 的基于苯已烯已烯基苯的反相色谱柱。
DNA,dsRNA 和 ssRNA 根据长度进行分级。
长度相似的双链和单链物质分离的选择性受碱基配对程度的影响

SDVB 和 PrimaS 可用于评估。

五.定制专属于你的固定相配体
我们的研发可以固定定制的寡核苷酸序列,蛋白质或酶。

  • 定制和专有的寡核苷酸序列可以提高产物的纯度,并且可以固定在整体基质上。

固定化酶可以减少酶的使用和成本,消除酶的去除步骤,并提高消化效率。

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