关于胰酶

Trypsin 和 Tryple 的故事

胰酶消化的细节，你知道多少？

细胞学实验中我们除了遇到污染的难题之外，消化的问题，也不容小觑。消化不好，就会导致细胞状态变差，甚至死亡。尤其是在某些需要无血清培养的贴壁细胞中，可以尝试用 tryple 消化细胞，因为 tryple 不需要胰酶抑制剂终止消化，直接用 PBS 稀释终止消化就可以了。这样避免了与血清的直接接触，血清中的复杂成分也不会干扰细胞潜在的生理功能，改变细胞分裂的正常状态，对于一些敏感细胞来说，这个改变是致命的。

曾经养过一种上皮细胞，一开始用 tripsin 消化血清终止之后，细胞还是正常生长的。但是发现消化重悬之后细胞贴壁，但是不变形，总是以为消化时间过长导致的；后来降低了消化时间，情况未改观，并且一次比一次明显；到最后，细胞附着在培养瓶底部、球形、一直不变形；而变了形的细胞，状态和之前的完全不一样，好像变成了另外一种细胞，最后挂掉了。后来，在我公司生物学专家的帮助下，我们换了 tryple，情况发生好转，因为不需要用血清终止消化，只需要用 PBS 终止消化就可以了，看到细胞越来越好，心里也越来越开心。


 
看一下 tryple 和 tryspin 各有什么优缺点吧。

Trypsin 的缺点：

• 细胞损伤大－Trypsin 抑制剂需要将酶快速灭活，这会导致细胞损失或死亡。

• 冷冻保存－Trypsin 必须保存在－20 ℃，在经过多次反复冻融或在 4 ℃ 长期保存后，稳定性丧失。

• 批间差异大－Trypsin 为动物源性，批次之间差异性大。

Tryple 的优势

• 细胞损伤小－TrypLE 为非动物源性的消化酶，更纯，对细胞损伤更小，提高种板效率。因为 TrypLe 作用细胞温和，不需要 Trypsin 酶抑制剂。

• 室温保存稳定性高－TrypLe 可以稳定的保存于室温，节省了冷冻空间，同时提供即时可用的便利。

• 应用范围广－TrypLE 是在有血清或无血清环境中培养的多种不同细胞系的理想选择，可以直接替代您现有步骤中所用的 0.25% trypsin EDTA 试剂。

Tryple 的超高稳定性

TrypLE 表现的动力学及剪切特异性与 Trypsin 非常近似，而其稳定性却比前者有明显提高。工作储存温度可以为室温保存 6 个月或 37 ℃ 一周后酶活性仍不丢失。TyrpLe 试剂的纯度比 Trypsin 高。室温稳定性比较高。

所以，tryple 就相当于某些无血清生长的贴壁细胞的救星啦！