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使用TRIS缓冲液将pH控制在约7-8范围内，常规更多的会使用磷酸盐，因为其价格更加便宜，但是磷酸盐会导致其测试样品中的生物物质发生不良反应。 当要在溶液上进行pH测量时，必须认识到涉及pH电极系统的另一种“不良反应”。大多数组合pH电极使用的普通氯化银-氯化银参比电极具有氯化钾盐桥，该桥被氯化银饱和。 这种系统在大多数样品中均能很好地起作用，但在含有蛋白质或相关物质的生物样品中却不能很好地起作用。极低的银离子浓度（约0.0001 M）足以与蛋白质反应，并在电极的多孔液结结构中产生不溶的沉淀，因此由于产生大量的“液结”电势而导致pH测量错误穿过沉淀物。  通过使用带有甘汞参比内部元素的电极或“双结”设计，可以非常简单地避免此问题。参比内部电池都包含在盐桥内的玻璃管结构中，而氯化钾溶液中不含重金属。因此，没有不需要的沉淀物形成，参比结保持不堵塞，并且液接电位保持可以忽略不计。 Tris缓冲溶液中的准确pH测量 Tris或tris（羟甲基）氨基甲烷已被广泛用作生物介质中的pH缓冲剂，已经有约35年了。Tris不吸水，易溶于水，好的厂家纯度也高，它不会沉淀钙盐，在室温下可在溶液中稳定数月，并且不会抑制许多酶系统。 在60年代后期，当用于测量tris pH的参比电极具有亚麻纤维接头时，获得的pH读数将会出现不正确的情况，这个问题虽然很容易消除，但引发了许多有关与tris缓冲区一起使用的的问题。 此外，由于tris缓冲液的化学和物理性质，使用不当可能会导致pH值测量错误。建议使用tris缓冲液时选用最适合pH测量的电极系统。  Tris缓冲液的化学和物理性质对pH的影响 tris缓冲液在其实际缓冲液范围（pH 7至9）内，缓冲液值，稀释值和近似温度系数。常用于生理测量的pH范围（pH 7至7.5）中的tris没有大的缓冲能力。因此，使用tris缓冲液控制样品pH值时应格外小心。 为了获得准确的结果，在使用tris进行标准化时会利用温度pH依赖性，从而直接得出结论，使用tris来控制样品的pH值时，控制程度将取决于样品的温度。如果样品温度变化2°C，则pH控制值将变化约0.06 pH单位。所需的pH控制将决定最大允许温度波动。 使用tris来控制样品的pH值时，应考虑与样品发生反应的可能性，如tris与银离子形成稳定的络合物，则在使用tris来控制样品的pH可以排除样品中银离子的存在。 使用Tris缓冲液进行PH测量 甘汞或银/氯化银类型参考对于大多数测量都是令人满意的。但是，考虑引入重金属离子（Ag +，Hg22 +）的可能性。当使用甘汞参考液时，由于氯化汞相对于氯化银的溶解度较低，因此不太可能出现此问题。可以通过使用双参比系统和任何一种参照物来避免将重金属引入样品中。 Tris缓冲液应使用不含二氧化碳的蒸馏水或去离子水由高纯度tris和HCl制成。 Tris缓冲液的pH值取决于温度。为了最精确地工作，所有溶液都应恒温。 |
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