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免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种．它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。作为一名刚进实验室的小菜鸟，看了一下师姐的实验记录文档，那叫一个漂亮：
兴致勃勃的开始，一筹莫展的结局，我的是这样的
明明是按照同款操作步骤进行的，谁能给我一个解释，好在有位好心肠的师姐： “你看下是不是细胞通透的时间不够，还是因为操作不熟悉zui后信号淬灭了，文档里的实验方法是好久之前的，一直没有更新。之前我们也都是摸索好几次，配的甘油进行封片的，但是效果时好时坏，好在后来直接用了现成的封片剂。。。。。”走过的弯路再走几次很可能还是弯的，但是师姐一句话就把它捋直了！ 其实其他的倒没什么，不过“现成的”这三个字甚合我意！ 现成的Fluoromount-G®封片剂，无需复杂有机溶剂溶解和孵育步骤，只需滴加一滴，就可以轻易解决从即时观察、短期观测到长期保存的所有问题，助你轻松get一张精美的免疫荧光图片。不仅可封片，还能防猝灭~ 什么是荧光猝灭？ 荧光素由内部因素和外部因素同时作用引起的不可逆破坏，导致荧光强度降低或丧失的现象。内部因素主要是分子从激发态回到基态以非辐射跃迁形式释放能量，外部因素主要因荧光分子在激发光照射下，历经多次激发/发射过程，导致分子内部结构发生不可逆变化，从而使其无法吸收更多光子，影响荧光的进一步发射，即分子的光漂白（Photobleaching）。另外，当激发光功率过高，荧光分子也可能被漂白，造成荧光淬灭现象。 什么是Fluoromount-G®封片剂？ Fluoromount-G是一种水溶性、非荧光性化合物，用来对zui后一步染色为水溶液体系的玻片样本进行封片，可以明显降低荧光显微镜下玻片样本分析中的荧光淬灭现象。而且，还可以提供含有细胞核探针DAPI形式的Fluoromount-G，可同时实现复染和封片，实用性更高。 Fluoromount-G®封片剂的特点是什么？ 1.经典的水溶性抗荧光淬灭封片剂，数千篇应用文献，被外各大实验室认可； 2.与绝大多数荧光素兼容，包括FITC，PE，APC，Texas Red，罗丹明等，防止荧光淬灭； 3.操作其简单，只需滴加一滴即可实现封片； 4.光学透明，封片后光折射率佳； 5.封片后可实现样本低温长久保存； 6.稳定性高，室温运输和保存即可； 7.两种供货形式：不含细胞核探针（cat#0100-01）；含细胞核探针DAPI(cat#0100-01)；后者可同时实现复染和封片，实用性更高 ※ 贴壁细胞样品 染色完毕后，吸尽液体。 滴一滴(~50μl)封片液于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片液，尽量避免气泡。 随后即可通过荧光显微镜观察样品。 ※ 组织切片 染色完毕后，吸尽液体。 滴一滴(~50μl)封片液于组织切片上，盖上盖玻片，让切片接触封片液，尽量避免气泡。 随后即可通过荧光显微镜观察样品。 看到这，是不是觉得你离一张精美的免疫荧光图只差一滴Fluoromount-G®荧光封片液的距离！ |
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