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医.胚胎工程常用技术
2020-11-13 | 阅:  转:  |  分享 
  
体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎冷冻保存性别控制胚胎干细胞体外受精1、概念:哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成
受精过程的技术。2、过程:(1)采集精子(2)采集卵母细胞(3)受精(一)采集精子(二)采集卵母
细胞大型动物:(牛,猪等一般用抽吸法)小型动物:(小鼠、兔等一般用机械破碎法)(三)受精胚胎体
外培养概念:将受精卵在人工环境下培养成早期胚胎。培养液:(不同时期成分不同)水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸
、核苷酸以及动物血清等。胚胎培养比组织、细胞培养要难。目前只能进行少数几种动物的不同阶段的胚胎培养,还无从受精卵到新生儿的全体
外培养技术。胚胎移植1.概念:也称“借腹怀胎”将良种母畜配种后,从其生殖道取出受精卵或早期胚胎,移植到生理状态相同的同种母畜
体内,使之继续发育成为新个体的技术。供体:提供胚胎的个体。受体:接受胚胎的个体。为什么胚胎移植能成功?移
动到任何一头动物子宫内都能发育吗?同种动物发情排卵后,在一端时间内供体\受体具有相同的生理环境。为什么能收集到胚胎?早期胚胎
一定时间内处于游离状态。供体和受体会不会发生排斥?同种动物之间基本上不排斥。移植的胚胎能保留供体双亲的特性?遗传特性不受受
体的影响。胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但与受体的遗传物质无关3.胚胎移植成功与否要有两个条件(1)胚胎移植一般应在同
种的雌性供体和受体之间进行。(2)进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。胚胎移植的优势:充分发挥雌性个体的繁殖潜力缩短
供体本身的繁殖周期保持供体优良特性大规模繁殖节约成本\费用可用于保护珍稀动物……胚胎分割1.概念:1、分割什么时期
的胚胎?发育良好的,形态正常的32细胞期或囊胚.2、用什么仪器来分割?实体显微镜和显微操作仪;切割刀、切
割针4、胚胎分割的基本过程胚胎移入培养液;分割胚胎(机械法、酶处理);移植胚胎给受体;着床产仔。胚胎干细胞1
.概念:(ES细胞),是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。2.特点:1)形态:体积小、细胞核大、核仁明显.2)
功能:具有发育的全能性,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。3)体外培养ES细胞可以增殖而不分化。对它可以进行冷冻保存,也可以
进行遗传改造。胚胎干细胞的培养培养关键:需要一种能促进胚胎干细胞的生长,但抑制其分化的一种培养体系。
培养过程:1、制备饲养层(胚胎成纤维细胞);2、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层;3、酶消化
或机械剥离内细胞团;4、分为单个细胞。5、加饲养层培养。胚胎干细胞核移植概念:将胚胎
干细胞核移植到去核的卵细胞中,经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。过程:细胞核移植;
胚胎培养;胚胎移植。胚胎干细胞的主要用途:①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律;②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料,在
培养液中加入分化诱导因子,如牛黄酸等化学物质时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了
有效的手段;③可以用于治疗人类的某些顽疾,如帕金森综合症、少年糖尿病等;④移植ES细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功
能;⑤随着组织工程技术的发展,通过ES细胞体外诱导分化,定向培育出人造组织器官,用于器官移植,解决供体器官不足和器官移植后免疫排
斥的问题。胚胎干细胞的应用前景干细胞的分类:按分化潜能分:(1)全能干细胞:具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞。
(2)多能干细胞:具有分化出多种细胞组织的潜能,失去发育成完整个体的能力。(3)专能干细胞:只能向一种类型或密切相关的两种类型
分化的细胞。如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。按来源分:(1)胚胎干细胞:当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团的细胞即为胚胎干
细胞。(2)成体干细胞:指已分化特定组织中的未分化细胞,可来源于胚胎、胎儿和成人的组织中,如造血干细胞、神经干细胞、成肌细胞等
。胚胎工程:研究的重要内容:(技术手段)研究的对象:生殖细胞、受精卵和早期胚胎理论基础:胚胎发育学1)采
集的方法:2)获能处理:(牛、羊)一定浓度的肝素、A23187溶液(钙离子载体)溶液
假阴道法阅读课本P82,找出对不同动物,采集卵母细胞的方法分别是什么,有哪些有优缺点?采集的方法:抽吸法、机械破碎法在获
能溶液或专用受精溶液中完成受精过程。良种雌性动物。一般品种的雌性动物。选择供体母牛受体母牛……同期发情处理……超数
排卵供体公牛配种取出早期胚胎质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩(胚胎移植的犊牛)2、胚胎移植的过程:未配种同期
发情技术:主要是借助外源激素剌激卵巢,使其按照预定的要求发生变化,使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段,从而达到同期发情。.
...2.优势:用显微手术的方法将一枚胚胎分割成二分胚、四分胚甚至八分胚。经体内或体外培养后植入受体,已得到同卵双生或同卵多生后代的技术。后代具有相同的遗传物质。可成倍增加胚胎数量,可以快速繁殖良种畜。3.特点:.讨论,.时期.加图,归纳.特点胚胎干细胞:内细胞团细胞;.优点
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(本文系紫气东来2ze...首藏)