第一步:打开网站https://wlab.ethz.ch/protter/start/第二步:设置Protein你可以在这个页面输入需要标注 的蛋白名称或具体的氨基酸序列(Uniprotproteinaccession),蛋白名称可通过基因名称在UniProt(htt ps://www.uniprot.org/)数据库获取。将获得的标准名称输入到如图对话框,点击“submit“即可。当然也可以输入 蛋白质列表(enteralistofproteins)。输入Protter对话框:如果要输入特定氨基酸序列,只需切换到“b ysequence”选项,然后在文本框中输入已知序列,或通过加载FASTA文件实现输入。输入后点击submit按钮,页面会呈现出 该蛋白的默认拓扑结构注释图第三步:设置Topology在这里你可以对结构图整体做调整,包括是否显示膜结构,蛋白跨膜区域范围。No membrance:选择“nomembrane”,即可在图中不展示膜结构;Automatic:页面展示自动生成的拓扑结构,对于 输入UniProt标识符的情况,展示的是带UniProt自动注释的拓扑结构,对于输入氨基酸序列的情况,展示的是Phobius预测的 拓扑结构;Custom:对膜内区域和跨膜区域序列做出自定义。第四步:设置Styles在这个功能中,你可以使用自定义样式来突出显示蛋 白质序列的某些区域。这一步可以根据已有的实验数据列表,在“region”中对每一个位置的氨基酸做出设定。包括氨基酸字母的颜色,氨基 酸符号的形状,符号的框架颜色,符号的背景色。你也可以在“region“中自定义序列范围,对该类别颜色和形状做出调整用以突出显示。选 择“+”按钮,可以增加注释项。“delete”按钮可以删除对应注释项。比如在Region区域直接输入氨基酸位置列表(如1,3,4, 每个位置一行),在最终形成的拓扑结构图的1,3,4号氨基酸位置则会显示对应的“shape”和“color”,即在一个“name”分 类下快速完成多个变异位点一次性设定。注释用的颜色,可以从140种SVG兼容颜色中进行选择。第五步:设置Miscellaneous在 该项中,可以调整蛋白展示的细节,包括膜的颜色,跨膜区标识的颜色和样式;可以在“protease“中选择需要的蛋白酶,这样在最终展示 中,会用虚线显示对应蛋白水解酶的酶切位点;可以选择是否每十个氨基酸标注位置;可以选择是否添加图例。第六步:导出标注好的结构图在展示 区域,你可以放大、缩小或刷新结构图,可以将蛋白质可视化结果下载为PDF,SVG或PNG文件,也可以发送图的链接等,在”openi nUniProt”选项,可以查找到蛋白质的功能、序列、二级机构图等更多信息。 |
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