1. 将待标记的抗体/蛋白(浓度≧1mg/ml)对标记反应液 (90mM NaHCO3,10mM Na2CO3,126mM NaCl,pH9.0) 于4℃透析三次。 2. 将FITC(Frdbio)溶于DMSO中,浓度为20mg/ml。每次交联使用的FITC均应新鲜配制,避光。 3. (抗体/蛋白质:FITC)=1mg:150μg的比例将FITC缓慢加入于抗体溶液中,边加边轻轻晃动使其与抗体混合均匀,避光4℃反应8h。 4. 加入5M的NH4Cl至终浓度50mM,4℃终止反应2h。 5. 将标记产物在PBS中透析4次以上,至透析液清亮。 6. 交联物的鉴定 蛋白浓度(mg/ml)=[A280–0.31×A495]/1.4 抗体/蛋白质:FITC比例=3.1×A495/(A280–0.31×A495),该值应介于2.5~6.5之间。 7. FITC标记的蛋白应置于pH7.4的磷酸盐缓冲液中,加入0.1% NaN3、1% BSA,30%甘油,短期保存于4℃避光,长期应该-20℃避光保存。 荧光素FITC标记蛋白 荧光素FITC标记的抗Brdu单克隆抗体 异硫氰酸荧光素(FITC)标记胸腺五肽(TP5)FITC-TP5 FITC标记的叶酸类衍生物 FITC荧光标记糖 FITC标记某一种药物 FITC标记一种糖蛋白 实验用FITC标记小分子化合物分子量400-500 FITC-Phalloidin FITC标记鬼笔环肽 FITC荧光素标记细菌 FITC标记葡聚糖 FITC标记重组灵芝免疫调节蛋白 5'——FITC标记的PCNA反义寡核苷酸 FITC标记的帕西瑞肽衍生物 FITC标记糖肽类抗生素 FITC标记的虾自斑综合症病毒 FITC标记的维生素B12衍生物 荧光素FITC标记甘氨酸 FITC标记壳聚糖荧光浆料 FITC标记红桂木凝集素 小编YQ2021.1 |
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