靶向代谢组学分析主要是以标准品为参照,对特定的代谢物群进行有针对性地、特异性地检测与分析。通常采用的技术方案包括常规的液质联用(LC-MS)分析技术和选择性反应/多反应监测技术(MRM/ SRM)。常规分析法首先利用LC-MS的方法对待分析样本进行大规模代谢组分析,然后通过与相同分析条件下标准品的分析结果进行比对,实现对样本内目标代谢群的定性和定量分析。MRM/SRM技术是基于已知或假定的反应离子信息,有针对性地选择数据进行质谱信号采集,对符合规则的离子对进行信号记录,去除不符合规则离子信号的干扰。定量过程中,该技术首先筛选到目标代谢物特异性的母离子,然后选择性地对这些母离子进行碰撞诱导,去除其他离子的干扰,只对选定的特异MS/MS2离子进行质谱信号的采集,从而实现对目标代谢分子更为特异、灵敏、准确的分析。 靶向定量代谢组学技术路线: 代谢组学适用范围: 体液:血清、血浆、尿液、唾液、膝盖滑液、脑脊液、卵泡液、牛奶、痰液、舌苔液、淋巴液、胆汁等 组织:各种动物组织和植物组织 细胞:细胞及细胞培养液等 微生物:大肠杆菌、链球菌等 其他:粪便、食糜、肠道内容物等 靶向代谢组学应用领域: 非靶向代谢物组学结果的验证 代谢相关生理、病理研究 发酵工艺研究 食品科学与营养学研究 靶向代谢组学技术特点: 方法特异性强:只针对明确的目标代谢物进行方法设置及优化; 定量准确度高:定量的基础建立在严格的标准品对应的标准曲线之上。 |
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