【原】同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ)技术原理

iTRAQ (isobaric tags for relative and absolute quantitation）技术是由美国应用生物系统公司ABI 研发的一种多肽体外标记技术。iTRAQ 4标 或8标的同位素标记试剂由4种相对分子质量分别为114，115，116和117Da或8种相对分子质量分别为113 ，114 ，115，116，117，118，119 和121Da的报告基团（reporter group），相对分子质量分别为31~24Da的质量平衡基团（balance group）以及一个相同的肽反应标记试剂基 团（peptide reactive group）组成。不同的报告基团分别与相应的平衡基团相配后，相对分子质量均为145，即等量异位标签（isobaric tag）。

iTRAQ技术优势：

• 同时对2-8种不同条件样品进行蛋白质差异分析；

• 不会破坏所测定的蛋白质；

• 适合样品类型多：胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等；

• 与凝胶分离的蛋白质定量技术相比，iTRAQ质谱定量技术可检测到更多类型的蛋白质分子，如低丰度蛋白质、强酸（碱）性蛋白质、<10KD或>100KD的蛋白质分子；高通量，可一次实验，实现多个样品的蛋白质定性定量；

• 标记完全，标记效率高达97%以上；

• 几乎兼容所有来源的样本；

• 定量敏感，反应速度快，实验周期短。