【原】重度免疫缺陷小鼠（C-NKG小鼠）模型构建

品系名称：NOD/Shi-Prkdcscid Il2rgem1/Cyagen

简称：C-NKG小鼠

背景：NOD/Shi-Scid

品系构建策略：

C-NKG 小鼠是通过CRISPR/Cas9 技术在NOD/Shi-scid背景品系上敲除Il2rg基因自主研发的一款重度免疫缺陷小鼠。

品系说明：

• 缺乏成熟的T、B和NK细胞。

• 补体活性降低。

• 巨噬细胞对人源细胞吞噬作用弱。

• 树突状细胞功能下降。

• 无T、B细胞泄漏。

研究应用：

• CDX和PDX。

• 细胞免疫疗法的有效性和安全性评估。

• 免疫系统人源化小鼠模型的制备（移植人PBMC或HSC进行人免疫系统重建）。

• GvHD模型。

• 肿瘤免疫相关研究。

表型验证：

1. Prkdc基因突变

图1. Prkdcscid突变是由Prkdc基因84号外显子中的TAT→TAA产生的，基因测序结果表明，C-NKG小鼠携带有Prkdcscid突变。

2. Il2rg基因敲除

图2. 对C-NKG 小鼠Il2rg基因进行PCR检测，结果表明C-NKG 小鼠Il2rg基因成功敲除。

野生型条带大小：1430bp；敲除部分片段条带大小：388bp。

3. C-NKG小鼠外周血中B、T、NK细胞的检测

图3. C-NKG小鼠外周血中的B、T、NK细胞严重缺失，为重度免疫缺陷鼠。

取BALB/c、 C-NKG小鼠的外周血，对其T 、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明 ，与BALB/c小鼠相比，C-NKG小鼠外周血中的B细胞（CD3-CD19+）、T细胞（CD3+CD19-）、辅助性T细胞（CD3+CD4+CD8-）、细胞毒性T细胞（CD3+CD4-CD8+）、NK细胞（CD335+CD3-）几乎完全缺失。

4. C-NKG小鼠淋巴组织中B、T、NK细胞的检测

图4.  C-NKG小鼠淋巴组织中的B、T、NK细胞严重缺失，为重度免疫缺陷鼠。

取BALB/c、 C-NKG小鼠的淋巴组织，对其T 、B和NK细胞的组成进行代表性流式细胞免疫表型分析及统计对比。结果表明 ，与BALB/c小鼠相比，C-NKG小鼠淋巴组织中的B细胞（CD3-CD19+）、T细胞（CD3+CD19-）、辅助性T细胞（CD3+CD4+CD8-）、细胞毒性T细胞（CD3+CD4-CD8+）、NK细胞（CD335+CD3-）几乎完全缺失。