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兰花作为我国10大传统名花之一,种植历史悠久,深受国人的喜爱。近年来,因兰花具有极高的观赏价值和经济价值,已成为热带和亚热带地区最重要的花卉和最大鲜切花之一,是花卉产业的重要组成部分,并迅速向工业化方向发展[1]。同其他植物一样,兰花在生长过程中,也常会遭受各种病原微生物的侵染,产生腐烂、猝倒、枯萎、炭疽、痂斑、斑点等症状,严重影响兰花的生长和品质。其中,在各兰花种植地普遍严重发生的真菌病害有:由刺孢盘属(Collectotrichum)引起的炭疽病、由小核菌属(Sclerotium)引起的白绢病、由镰刀菌属(Fusarium)引起的茎腐病等[2]。兰花病害一般采用化学药剂防治,但可引发以下一系列问题:农药使用过量,引起兰花药害;对侵染病原菌判断不准确,不能对症下药;错过防治适期,防治效果低;长期单一使用杀菌剂,使病原菌产生抗药性;污染环境等。目前研究者在应用微生物防治兰花病害及促进兰花生长方面也做了一些有益尝试,如朱秋潮等利用芽孢杆菌(Bacilluspumilus)223菌株及其提取物浸泡或浇灌兰花种苗,对兰花茎腐病的防效达到80%以上[3];陈金花等应用从野生五唇兰植株上分离筛选到的10株具有解纤维和解磷能力的菌株处理五唇兰后,有8株对五唇兰组培苗生长均有促进作用[4],显示了微生物在兰花防病促长方面的应用潜力。本研究应用自有生防菌株T2-16的分生孢子制剂,通过对建兰培养基质处理及生长期喷雾处理,研究其对建兰上述4种常见病害的防治作用以及对建兰生长的影响,以期获得一个对兰花病害生物防治的有效途径。1材料与方法1.1材料供试兰花品种:建兰。供试生防木霉菌:为本实验室自有、中国典型培养物保藏中心登记保藏的哈茨木霉T2-16菌株。供试杀菌剂:纯白多菌灵(花卉专用),江苏无锡益农化工有限公司。试验在湖南省长沙市马坡岭湖南省园艺研究所兰花栽培园进行。1.2方法1.2.1木霉菌剂的制备[5]以麦麸、米糠为培养基主要成分,接种种子菌后经固体发酵,制备分生孢子粉母剂,再加入适宜的助剂制备成孢子浓度为1108孢子/g的分生孢子固态制剂;以麦麸汁、玉米粉汁为主要培养基成分,接种种子菌后在发酵罐中按适宜设置条件进行液体发酵培养,发酵完成后将发酵醪用氢氧化钠溶液调至pH值为7.5,闷罐过夜,用灭菌纱布真空过滤,密封包装,即成哈茨木霉T2-16菌株液态制剂。1.2.2木霉固体制剂在兰花移植时的应用及效果调查兰花(建兰)分株移植时,在已准备的常用栽培基质中,按T2-16固态制剂与栽培基质150的质量比为1100的用量,添加适宜剂量的T2-16菌株固态制剂。充分混匀后分装装盆,再移入兰花植株,每盆1株。同时以种植基质喷洒纯白多菌灵土壤消毒、及不添加T2-16固态制剂为对照。每处理90盆(株),每30株为1重复,各重复随机排列,记载每株叶片数。供试盆栽苗按常规方法管理,30d、120d后逐盆调查每株兰花新生苗数;120d后同时调查兰花炭疽病、白绢病及茎黑腐病3种重要病害发生情况。其中,茎基腐病逐盆调查每处理各重复发病总株数;白绢病、炭疽病病害严重程度用病害分级法统计。白绢病病害分级标准以整株为指标,每处理各个重复随机调查20株,具体分级[6]:0级,整株无症状;1级,植物基部近地面处出现水渍状不规则褐色小斑点;3级,植物基部和周围土壤表面有少量白色棉絮状菌丝;5级,菌丝在植物基部扩散,并有少量白菜籽状菌核;7级,植物基部及周围土壤有大量褐色菌核,植物基部腐烂严重;9级,植株萎蔫死亡。炭疽病病害分级标准以叶片为指标,每处理各个重复随机调查20片叶,具体分级[7]:0级,未
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