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很久以前有一个人，说了这么一句话“PCR只是一个简单的不起眼的玩意儿”。 他就是PCR技术（聚合酶链式反应）的发明者，1993年诺贝尔生物学奖的获得者——凯利·穆利斯（Kary Mullis)  凯利·穆利斯 Kary Mullis 那是在一个周末的晚上，他与一位同事去乡村别墅在蜿蜒的乡间公路上开着车，白天在研究合成寡聚核苷酸，所以闲下来的时候看什么都像是DNA的结构。 当车在蜿蜒的山路上快速通过时，他脑中突然闪过一个想法，是不是DNA也可以反反复复的复制。 于是学霸穆利斯就开始研究单引物、双引物对复制的影响，这个时候还不能叫PCR，因为还没有引入“循环”的概念。穆利斯设想DNA呈指数增长，并且具有专一性。 这就是PCR最初的概念，穆利斯创造的奇迹是：将PCR概念变成了可操作的实验系统，变成了一项成熟的技术。 Smith等发现了内切酶，这使得体外克隆基因成为可能。 Cetus公司的 K. Mullis在这年底（12月16日第一次成功实验）发明了PCR。 关于PCR 的文章首次由Cetus公司Saiki等人在Science上发表 Russ Higuchi来到PCR的诞生地Cetus公司工作探讨“闭管PCR”的可能 这就是荧光PCR技术的诞生 7月Cetus公司在美国获得PCR基本技术专利批准。1985年底成立的Perkin-Elmer Cetus仪器公司（PECI）于这一年的11月推出了第一个PCR试剂产品及第一台热循环仪。 Cetus公司的Saiki等从温泉中分离的一株水生嗜热杆菌中提取到一种耐热DNA聚合酶，此酶最大的特点就是耐高温，不需要每次加入，大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，这就是TaqDNA聚合酶，此酶的发现使PCR广泛的被应用。 耐热性DNA多聚酶(Taq酶)的发现,预示着分子时代的到来。 12月《Science》杂志将PCR和它所使用的聚合酶命名为第一个“年度分子”。Hoffmann-La Roche 公司和Cetus开始合作将PCR应用于临床诊断。 Cetus科学家D.Gelfand和S.Stoffel发明了纯化TaqDNA多聚酶的方法。 Cetus 科学家H. Erlich 和K. Mullis在德国临床化学领域获得生化分析奖。 TaqMan技术发表。当年11月Hoffmann-La Roche公司从Cetus获得全球 的PCR专利权。 Roche Molecular Systems 创建了单一耐热多聚酶rTth 进行RT-PCR技术，并用于临床RNA病毒检测。 耐热逆转录酶首次由Cetus科学家发现并报道。 当年3月Cetus公司获得Taq酶、热循环扩增仪等专利； AMPLICOR HCV*首次用于临床RNA PCR 标准试剂盒。 Kary Mullis 因PCR的发明获得诺贝尔化学奖。 九十年代中期PCR临床应用在国内全面展开 实时荧光PCR技术开始在中国较广泛的应用于临床检测 西方发达国家尝试将PCR应用于血液筛查 各类PCR产品遍地开花......... |
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