培养基上培养。此法适于微室栽培，但往往有药壁等体细胞混入。
2.2花粉的预处理
1低温处理在花粉第一次有丝分裂期进行低温处理。
②重力的作用在从花蕾中取出花药前1小时，在5℃条件下进行
低温离心机离心，可提高单倍体的诱导率。
2.3培养基成分
在花粉培养中可添加一些物质，有促进生长的作用。培养基选用Ni
tsch作基本培养基，含有诸如硝酸钙、硫酸、柠檬酸铁、酵母浸出液
和椰子胚乳等。
2.4花粉培养方法
①微室培养法取含有50～80粒花粉的一滴培养液放在微室培养装
置中，为了防止花粉破裂，应在低倍条件（4℃以下）接种，然后在2
0℃下培养。
②看护培养法在装有50ml液体培养基的小培养皿中，用解剖针撕
开花药释放出花粉，形成花粉悬浮液，最后稀释至0.5ml培养基中，
含有10个花粉粒的细胞悬浮液。看护培养时，把花药放在琼脂培养基
表面上，然后在每个花药上覆盖一小块圆片滤纸。用移液管吸取1滴
已准备好的花粉粒悬浮液，滴在每个小圆片滤纸上。培养在25℃和一
定光照强度下，大约一个月长出细胞群。由于完整的花药发育过程释
放出有利于花粉发育的物质，并通过滤纸供给花粉，促进了花粉的发
育。 |
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