【原】检测肿瘤患者侵袭性真菌病的最佳检测方法是什么？本文将给你带来答案！

临床医学检验技师考试专业真题

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一、何谓侵袭性真菌病？

1.侵袭性真菌病又称侵袭性真菌感染（invasivefungalinfections，IFIs），是指真菌入侵人体组织、血液,经生长繁殖对机体组织、器官功能造成损害,并引发炎性反应的一种感染性疾病。

2.侵袭性真菌病的流行病学

最常见的病原菌是以念珠菌为主的酵母样真菌和以曲霉为主的丝状真菌引起的感染最为常见。分别占到70%~90%和10%~20%。

近年来，随着肿瘤患者手术和放化疗等治疗技术的广泛开展，由恶性肿瘤、免疫缺陷、移植患者数目的增多以及长期应用广谱抗生素、延长体内留置导管时间等，侵袭性真菌病发生率呈逐年上升趋势。

例如，重症监护病房内患者的发病率约占8%~15%，器官移植受者的发病率为20%~40%，血液系统肿瘤患者的发病率达31%。

据不完全统计，全球150万种真菌中有400多种可以导致严重的人类感染。相比于其他微生物感染，临床对于真菌感染的认识不深、诊断方法有限、很多病人未能得到及时的诊治。侵袭性真菌感染每年夺走160万人的生命，死亡人数等同于疟疾和结核（Bongominetal.2017）。

侵袭性真菌病常见于免疫功能低下人群,近年来,,患者受到真菌感染的发生率呈明显上升趋势,如何及时诊断并有效地治疗侵袭性真菌病受到越来越多的关注。

二、真菌检验技术介绍

1.目前,真菌检验技术主要包括

①真菌培养

②组织病理学检查

③真菌涂片镜检

④血清学检测

⑤分子生物学技术。

2.真菌检验技术的优势与劣势比较

真菌培养和组织病理学检查是真菌病最传统的诊断方法。但是这两种检验方法具有如下缺点：

①真菌培养的缺点：

◆如果取材自非无菌部位，则无法确定是否为感染。

◆如以侵入性检查从无菌部位获取待测样本，一般患者难以依从，重症患者一般难以实施。

◆培养需要较长时间。虽然新型培养基、自动化血培养系统的出现显著降低了微生物培养时间，然而未有明确证据表明这类进展可以提升诊断的敏感性。

◆后续的镜检应当由经验丰富的检验人员操作。

②组织病理学检查的缺点：

◆虽然其作为常用的确诊方法，但缺乏灵敏性和精确性。比如同一菌种的菌丝，在镜下会表现出不同的形态。当需要将曲霉同其他丝状菌区分以指导选择抗真菌药时，组织病理学检查结果常会出现问题。

③真菌涂片镜检的优点与缺点：

◆比上述两种方法更快速、简单，成本也更低。

◆直接镜检受主观因素影响较大，对检验技术要求高，由于实验室人员识别能力参差不齐，其阴性并不能明确排除真菌感染。

④血清学检测技术可大致分为抗原检测和抗体检测两类。

抗原检测包括：G试验、GM试验、GXM试验（隐球菌荚膜多糖）、Mn试验（念珠菌甘露聚糖）等。

抗体检测包括：各个属特异性IgM、IgG抗体检测。

G试验检测靶标为真菌细胞壁非特异性成分（1-3）-β-D葡聚糖，主要用于全真菌非特异性快速筛查（除隐球菌和接合菌外），为国内外指南推荐的真菌筛查技术。G试验可大致区分定殖或者侵袭性感染。G试验根据其发展，可分为三代。前两代样本处理使用“加热稀释法”，第三代样本处理法为碱处理法，从而大大减少了交叉反应。第三代G试验结果读取基于动态显色法，检验时间大致为1h。

◆第三代准确性高、稳定性强、抗干扰强。同时G试验对于侵袭性感染早期诊断意义很大。

三、相对于真菌培养技术耗时较长,组织病理学检查缺乏灵敏性等原因,血清学检测和实时PCR技术已发展成熟，采集血液标本易于常规实验室开展。

1.欧洲癌症研究和治疗组织/侵袭性真菌感染协作组(EORTC/IFICG)标准、美国真菌病研究组(MSG)标准、美国抗感染学会(IDSA)指南、我国《血液病/恶性肿瘤患者侵袭性真菌病的诊断标准与治疗原则(第四次修订版)》中都提到(1,3)-β-D-葡聚糖检测(G试验)是临床诊断侵袭性真菌病的诊断标准之一。

四、本文着重对血清降钙素原(PCT)检测、G试验和荧光定量PCR技术在肿瘤患者侵袭性真菌病早期诊断中的价值进行总结。

经临床研究比较这3种检验方法发现：

◆ (1,3)-β-D-葡聚糖可用于辅助侵袭性真菌病的早期诊断。但隐球菌、结核分枝杆菌引起的感染G试验为阴性或轻度升高。

◆ 实时荧光定量PCR检测的阳性率＞G试验＞PCT检测，实时荧光定量PCR检测和G试验对侵袭性真菌病早期诊断中具有重要参考价值。

五、早期诊断侵袭性真菌病的检验方式具有什么临床价值呢？

1.肿瘤患者在接受化疗后,由于自身免疫力低下容易引起侵袭性真菌病。快速、准确确定侵袭性真菌病的致病菌，选择合适的检测方法和指标对于早期诊断和治疗侵袭性真菌病有重要价值，可有效降低因炎症反应而导致的病理改变，以及死亡。

2.PCR技术具有耗时短,污染少,灵敏度、特异度高,以及重复性好的特点,阳性率高于血清PCT和(1,3)-β-D葡聚糖检测,是早期诊断侵袭性真菌病的最佳检验方法。

六、未来真菌检验技术的发展

近年来材料学以及生物传感器领域不断突破，病原体诊断、鉴定和定量分析的新方法和仪器方面得到了突飞猛进的发展。如微流控芯片实验室技术平台以及纳米技术增强了检测的敏感性、特异性和速度，因此各种基于恒温扩增的lab-on-chip 装置被广泛开发并拟用于临床病原体的检测。相信随着以上早期诊断技术的不断应用、改进和创新，将使未来真菌病早期诊断技术将更加快速、准确，同时对临床治疗和流行病学的研究产生重要的影响。 

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