实验室SOP文件 一、目的 规范实验室查找“污染”来源的操作过程,保证查找“污染”来源的全面性和及时性。 二、适应范围 临床基因扩增检验实验室。 三、责任人 临床基因扩增检验实验室工作人员。 四、操作步骤 1. 物品准备:生理盐水(或去RNA酶水)、1.5ml EP管、EP管架、采样拭子、带滤芯枪头、扩增检测试剂盒等。 2. 查找“污染”来源的检测途径 2.1 空气沉降检测: 2.1.1 在试剂准备区、样本制备区和扩增分析区实验台面上分别放置开盖装有生理盐水(或去RNA酶水)的EP管,过夜。测试试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的空间否存在气溶胶污染。 2.1.2 在洁净工作台面、生物安全柜内部和核酸提取仪内部分别放置开盖装有生理盐水(或去RNA酶水)的EP管,过夜。测试洁净工作台、生物安全柜内部和核酸提取仪的空间是否存在气溶胶污染。 2.2 物表检测: 2.2.1 用采样拭子蘸生理盐水(或去RNA酶水)分别对试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的实验台面反复擦拭后,放入生理盐水(或去RNA酶水)中进行洗脱。测试试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的实验台面上否存在污染。 2.2.2 用采样拭子蘸生理盐水(或去RNA酶水)分别对洁净工作台面、生物安全柜台面和荧光PCR仪内壁反复擦拭后,放入生理盐水(或去RNA酶水)中进行洗脱。测试洁净工作台、生物安全柜内部、核酸提取仪和荧光PCR仪内面是否存在污染。 2.3 移液器检测: 2.3.1 将配液的移液器和加模板的移液器分别换上无滤芯枪头,在生理盐水(或去RNA酶水)中反复吹吸10次。测试移液器内部是否存在污染。 2.3.2 用采样拭子蘸生理盐水(或去RNA酶水)后分别对配液的移液器和加模板的移液器的内外表面进行取样,取样后放入生理盐水(或去RNA酶水)中进行洗脱。测试移液器表面是否存着污染。 3. 将上述采集到的样本,按照扩增检测试剂盒说明书要求的和核酸样本量,直接加入扩增试剂的八连管内,上机扩增检测。同批次扩增检测应设有阳性对照和阴性对照(排除扩增过程中的假阴性和假阳性)。 4. 结果分析:按照扩增检测试剂盒要求进行结果分析。 4.1 在阳性对照和阴性对照结果正常的情况下分析检测样本。 4.2 若发现样本中有扩增曲线,即说明该样本检测的内容存在“污染”。 验小六的晚课时间 烹茗清谈之检,煮酒浅析于验。不敢阔谈,只做传递。爱好整理归纳,喜好总结思考。 33篇原创内容 公众号 |
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