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GBE技术是什么?

 生物学渣 2021-09-27

GBE技术是在CBE的基础上发展而来的。CBE在将C转变为U后,由于体内的UNG酶能将U碱基切除,形成无嘌呤无嘧啶的AP状态(apurinic/apyrimidinic)。在AP态时,能够触发碱基切除修复机制,将U重新变回为C,但是也能被修复为其他三种碱基[5]。CBE是通过抑制UNG的活性,提高C到U再到T的转换效率。而GBE则是利用AP态向其他碱基转变的可能。研究者将UNG与nCas9融合,发现在大肠杆菌中C变换成A是主要的编辑结果。但是在哺乳动物细胞HEK293T中则是以C转换成G为主要的编辑结果[6](图4)。可以看出在AP状态下,细胞中存在着一种未知的修复机制使得AP态往不同的碱基进行修复。因此这项技术仍需继续完善。

GBE在大肠杆菌中的编辑效果

GBE在HEK293T中的编辑效果

图. GBE在大肠杆菌或HEK293T中的编辑效果[6]

(A)GBE在大肠杆菌中的编辑效果。(B)GBE在HEK293T中的编辑效果

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