Streptavidin-thiol链霉亲和素通过巯基键合于固相载体的方法

1、一种新型链霉亲和素纯化填料，其特征在于：所述固相载体为聚合物微球、琼脂糖凝胶、磁性微球和多孔板表面载体。

2、其合成步骤如下∶(1)填料活化∶反应体系中琼脂糖凝胶微球占30%-50%、环氧氯丙烷占5-20%、1-2MNaOH,反应温度为20-40度，反应时间2-6小时。(2)配体偶联∶在步骤1反应后的体系中加入5Omg/ml咪唑琳酮类化合物的配体、0.1MNaCO ,pH调至8-10，反应温度20-50度，反应时间8-24小时。(3)封闭反应∶在步骤2反应后的体系中加入1M乙醇胺，pH调至8.5，温度在25-40度反应1小时，然后用去离子水清洗，即得到纯化链酶亲和素的亲和吸附填料。

3、所述步骤(2)中的咪唑啉酮类化合物为1-(2-氨基乙基)-2-咪唑琳酮或1-氨基咪唑烷酮。

 

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