病理学特殊染色技术：Gomori钙钴法（碱性磷酸酶）

Gomori钙钴法（碱性磷酸酶）

试剂：

    ①2%甘油磷酸钠水溶液10毫升

    ②2%巴比妥钠水溶液10毫升

    ③2%硝酸钙水溶液5毫升

     ④1%硫化铵水溶液

    ⑤孵育液：

        2%甘油磷酸钠（Sodium g lycerophosphate）水溶液10毫升

        2%巴比妥钠(佛罗钠，Sodium barbital)水溶液10毫升

        2%硝酸钙（Calcium nitrate）水溶液5毫升

        蒸馏水25毫升

    ⑥1%硝酸钴（Cobaltous nitrate）水溶液

    ⑦甘油明胶

方法：

    ⑴组织块厚2~3毫米固定于冷丙酮（木酮，Acetone）24小时，换2次，或甲醛固定冰冻切片

    ⑵丙酮固定的组织直接浸56~60℃石蜡，减压包埋20~30分钟，未减压延长时间。蜡块保存于冰箱（24小时以内），切片10微米，40℃以下粘片，放入干燥器内于冰箱干燥12~24小时或37℃温箱2小时使其干燥

    ⑶切片脱蜡经各级酒精下行至蒸馏水

    ⑷入提前于37℃温箱加温30分钟的孵育液（pH9.2~9.8)90~120分钟

    ⑸1%硝酸钙水溶液2分钟

    ⑹1%硝酸钴水溶液2分钟，蒸馏水洗2次共1分钟

    ⑺1%硫化铵水溶液1分钟，自来水洗5~10分钟

    ⑻甘油明胶封片，或经酒精脱水，二甲苯透明，树胶封片

结果：

    碱性磷酸酶浅灰色、灰黄色或灰黑色

    甲醛固定的冰冻切片：直接入孵育液

    对照片：浸于不加甘油磷酸钠的孵育液或80C加温60分钟，反应阴性