蛇床子抗骨质疏松症有效部位的研究

 蛇床子系伞形科蛇床属植物蛇床Cnidium monnieri( L.) Cuss.的成熟果实,全国各地均有生长。主产于河北、山东等省区。其主要成分是具有一定生理活性的香豆素类化合物。蛇床子有抗真菌、抗病毒、驱蛔虫、抗滴虫及类性激素样等作用。临床上多取其祛风燥湿、杀虫止痒作用,外用于抑菌、抗病毒、驱虫、止瘙痒,治疗妇科和皮肤科等疾病。经现代药理学研究,蛇床子除具有上述作用外,其中的总香豆素类化合物能增加激素致骨质疏松的大鼠的骨密度,防治骨质疏松。 本课题主要对蛇床子有效部位中总香豆素的提取、有效部位制剂成型工艺的优选、制剂质量标准以及抗骨质疏松症药效学进行了研究。在有效部位的提取工艺研究方面,采用超临界CO2流体萃取技术,运用正交设计法以萃取压力、萃取温度、解析压力和解析温度为实验因素,优选最佳工艺条件,从蛇床子中提取分离出总香豆素类化合物。采用紫外分光光度法测定了蛇床子中总香豆素的含量,结果得到的总香豆素萃取物含量超过50%。证明此提取方法具有操作可靠、分离效果极好、省时、用样量少、成本低、条件易于控制等特点;在有效部位制剂成型工艺研究方面,通过对比研磨法、超声法和逆向混合搅拌法三种包合方法的包合率和收率,最终优选出逆向混合搅拌法作为有效部位成型的最终工艺。用此法形成的包合物流动性好,粉末化程度高,提高了萃取物的稳定性,增加其水溶性,掩盖其麻辣味,便于制备得到胶囊制剂;在制剂质量标准的制定方面,采用薄层层析法对蛇床子有效成分制剂进行了定性鉴别,采用高效液相法测定了制剂中蛇床子素、欧前胡素的含量,且并对制剂中蛇床子素、欧前胡素的溶出度进行了测定,较好地控制了该制剂的质量;在此基础上,进行了抗骨质疏松症的药效学研究。实验表明:有效部位制剂能增强大鼠股骨的最大耐受力、抗弯曲强度、弯曲弹性模量、弯曲断裂能量及弯曲总能量;还可以使骨皮质明显增厚,改善骨小梁形态,显著增加骨小梁个数、骨小梁平均宽度和骨小梁百分比,对大鼠骨质疏松有明显的治疗作用。 总之,本研究的各项结果为蛇床子有效部位五类新药的研制及其中物质基础的寻找提供了一种可行的方法,为该制剂进一步的研究供可靠的理论依据。