离心机使用注意事项及风险预防一、离心机的分类 二、离心管的种类 三、离心管的安装 四、离心方法选择 常用的三种离心方法：差速离心法；速率区带离心法；等密度区带离心法。 1.差速离心法  差速离心法常用于生化样品的粗制品提取利用不同的悬浮粒子在离心力场中沉降系数的差别，在同一离心条件下，不同粒子沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液体分散系统中各种大小、形状不同的粒子分层沉淀。 操作过程中一般是在第一级离心后将上清液与沉淀分开，然后将上清液再在更高转速条件下离心，分离出第二部分沉淀，如此往复逐级加高转速，逐级分离出所需要的物质。差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于生化样品的粗制品提取。 2.速率区带离心  速率区带离心是一种不完全的沉降分离，沉降效果受物质本身物理尺度的影响较大，一般应用在物质大小相异而密度相同的情况， 是指根据待分离的粒子在离心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内，形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。 比如要从静脉血中分离出单个核细胞，前一种分离液Ficoll将血液中的所有单个核细胞（淋巴细胞和单核细胞）分为一个层，同时提取。而Percoll分离液将血液中淋巴细胞和单核细胞分为两个梯度层，分别提取。梯度液在离心过程中以及离心完毕后取样时，起着支持介质和稳定剂的作用，避免因机械振动而引起已分层的粒子重悬。 采用速率区带离心法时，需要严格控制离心时间，既要有足够的时间使各种粒子在介质梯度液中形成区带，又要避免任一待分离粒子形成沉淀状态。 3.等密度区带离心  等密度区带离心是指液体分散体系中不同颗粒存在浮力密度差时，在离心力场下，颗粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上，即等密度点，形成区带的离心方法。 等密度区带离心的离心效果取决于颗粒的浮力密度差，密度差越大，分离效果越好，与颗粒的大小和形状无关，但后两者决定着达到平衡的速率、时间和区带的宽度。 等密度区带离心方法的特点： （1）与样品粒子的密度有关； （2）与样品粒子的大小和其他参数无关 ； （3）转速、温度不变，则延长离心时间也不能改变这些粒子的成带位置。 五、离心机使用注意事项 螺纹不吻合，当开机运行时，转子盖抛出而发生严重的断轴事故。 8.离心管在装样时，因样品液未装满或离心管帽没有拧紧密封，在离心过程中离心腔内的高真空状态造成离心管变形、破裂和样品液外溢，造成转子不平衡而发生轴弯曲或断轴事故。 9.由于原样品的比重不等于配平液的比重，转子动平衡失调而发生事故。 10.管帽混用(两者比重不同)而发生事故。 11.对于各种材料的离心管，使用前没能仔细了解厂家要求的离心管使用范围和消毒方法，采用化学溶剂和不适当的消毒液处理，造成离心管在运行中溶胀、破裂而发生事故。 12.由于使用寿命管理不当和各种腐蚀损伤等，转子在运行中发生爆裂。 13.由于粗心大意，安装时未将驱动系统或其它系统的固定件去掉，并强行使仪器试运转而发生断轴和转子爆炸事故。 |
|
|
