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佛罗里达大学汪念博士首次用腺嘌呤\胞嘧啶碱基编辑器获得无转基因的基因编辑柑橘

 PaperRSS 2022-01-25

碱基编辑器,如腺嘌呤碱基编辑器(ABE)和胞嘧啶碱基编辑器(CBE),在不产生双链断裂(dbs)的情况下,为精确的基因组编辑提供了选择,从而避免了基因组不稳定和DNA修复导致的不可预测结果的风险。碱基编辑器介导的柑橘精确基因编辑尚未见报道。

在此,我们成功地利用ABE编辑了了甜橙(Citrus sinensis)口腔溃疡易感基因LOB1的启动子区TATA box。tata编辑过的植物对溃疡病病原体柑橘黄单胞菌亚种具有抗性。此外,CBE还成功地编辑了柑橘中的乙酰乳酸合酶(ALS)基因。经过als编辑的植物对除草剂氯磺隆具有抗性。两个als编辑过的植物没有显示绿色荧光,尽管转化的开始构建包含一个GFP表达盒。在抗除草剂柑橘中未检测到Cas9基因。这表明经过ALS编辑的植物是无转基因的,这代表着第一个使用CRISPR技术进行无转基因基因编辑的柑橘

总之,我们已经成功地将碱基编辑器用于精确的柑橘基因编辑。CBE碱基编辑器已被用于通过瞬时表达生成无转基因柑橘。

通讯作者:

nianwang@ufl.edu 

Citrus Research and Education Center. Department of Microbiology and Cell Science, Institute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida, 700 Experiment Station Road, Lake Alfred FL. 33850. USA

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