基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。 总体流程图如下。本人实际操作流程和图片步骤有些许出入。 ![]() 实验步骤 1先找到植物(以拟南芥为例),标记目标植株。摘取嫩叶一片放入离心管中,用机器把叶片打碎。如下面三张图所示。 ![]() ![]() ![]() 实验步骤 2在打碎叶片的试管中后加入300ul DNA extraction buffer。然后冲洗棒头后,提取其他样品。 ![]() 实验步骤 3放入离心机中12000,离心10min。 ![]() 实验步骤 4转移上清液到新的离心管中,加等体积的异丙酮,上下摇晃5次。 实验步骤 5放入-20度的冰箱10min以上。 ![]() 实验步骤 6放入离心机12000转速,10min。 实验步骤 7弃上清液,加入1ml 70%酒精 实验步骤 8放入离心机12000转速,10min。 实验步骤 9倒掉酒精,晾干沉淀物。 实验步骤 10晾干后加50μL超纯水。 当DNA实验提取完后,可以放入超微量分光光度计NanoPhoto中查看DNA提取浓度,以蒸馏水为对照,当数值大于50时说明提取成功,小于50说明提取失败。 ![]() |
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