Columbia Biosciences SureLight Glow 萤火虫荧光素酶细胞活力测定提供了一种均相且高度灵敏的方法,用于在细胞培养物中量化 ATP(细胞活力的指标)。该测定产生稳定的发光型发光信号,该信号与细胞培养物中存在的活细胞数量成正比。SureLight Glow 达到或超过领先竞争对手的规格和性能,成本节省超过 40%。 Columbia Biosciences SureLight Glow 萤火虫荧光素酶细胞活力测定试剂盒组分: 1.萤火虫萤光素酶(冻干) 2.D-荧光素(冻干) 3.裂解缓冲液(冷冻) 试剂制备: 1.解冻缓冲液;平衡至室温 2.用缓冲液重构冻干酶/底物 3.通过涡旋或轻轻颠倒混合 Columbia Biosciences 萤火虫萤光素酶细胞活力检测方案: 1.在培养基中制备含有哺乳动物细胞的不透明壁多孔板(例如,对于 96 孔板,每孔 100 µl) 2.制备含有无细胞培养基的对照孔 3.将测试化合物添加到实验孔中并根据细胞培养方案进行孵育 4.在室温下平衡板及其内容物,大约 15-30 分钟 5.在每个孔中添加与含有细胞的培养基体积相等的细胞活力试剂(例如,100ul 试剂加入 100ul 细胞培养基) 6.在轨道振荡器上混合内容物以诱导细胞裂解 7.让板在室温下孵育 5-15 分钟以稳定发光信号 8.在光度计上读取结果 左:活细胞数量与发光信号的相关性。在 100 µl RPMI-1640/10% FBS 培养基中制备两倍连续稀释的 THP-1 细胞(每孔 50,000 至 49 个细胞)。向每个孔中加入 100 µl 试剂,反应在室温下孵育 15 分钟。在发光计上测量发光信号并以相对光单位 (RLU) 表示。 右:发光信号随时间的稳定性。将等量 (100 µl) 的细胞活力试剂添加到 100 µl RPMI1640/10% FBS 培养基(活细胞)中的 50,000 个 THP-1 细胞中或仅添加到培养基(对照;无细胞)中。在发光计上的指定时间段内每 10 分钟监测一次发光信号。 SureLight® 铕胺反应性标记试剂盒 AD-EU-ITC-100 Cyclic AMP TR-FRET 试剂盒,1000 次测试 AD-cAMP-1K
|