刘梅教授：新型肝癌诊断标志物

南方菩提 2022-05-10 发布于广东省

展开全文

导语

近年来，肝癌出现了很多新兴治疗手段，为患者带来希望。但近七成肝癌患者在确诊时，已经发展到了中晚期，导致5年生存率低。如果肝癌患者可以实现早期诊断、早期治疗，其生存时间和生活质量都将得到极大的提高。

在近日举行的“肝癌在线”上，首都医科大学附属北京佑安医院刘梅教授作《新型肝癌诊断标志物》学术分享，从肝癌诊断标志物的角度介绍肝癌早筛早诊的发展近况。肝胆相照平台媒体部特将精华内容整理成文，以飨读者。

肝癌流行病学

肝癌是全球第6大癌症，2021年WHO最新数据显示，全球肝细胞癌（HCC）每年新发病例为90.6万。我国人口仅占全球的18.4%，而HCC每年新发病例达46.6万，占全球55.4%。

中国肝癌发病率及死亡率高，近七成新发患者已处于中晚期，近半数患者诊断时已发生转移，失去了最佳治疗时机，生存面临巨大挑战。与发达国家相比，我国HCC患者5年生存率明显偏低，而早期诊断是提高5年生存率的关键。

肿瘤标志物概念及意义

肿瘤标志物是指伴随肿瘤出现，通常是在量上增加或者结构改变的抗原、酶、受体、激素或代谢产物形式的蛋白质、癌基因和抑癌基因及其相关产物等成分。肿瘤标志物是由肿瘤细胞产生和分泌的，或是被释放的肿瘤细胞结构的一部分，存在于肿瘤细胞内，也经常释放至血清或其它体液中，能在一定程度上反映体内肿瘤的存在。

肿瘤标志物具有预测或监视肿瘤复发或转移的作用，为肿瘤的诊断提供依据，有助于评估治疗效果或者预测预后。理想的肿瘤标志物应具备特异性高、敏感性强、可信度高、稳定性强等特征。

目前临床上常用的肿瘤标志物有甲胎蛋白（AFP）、岩藻糖苷酶（AFU）、异常凝血酶原（DCP）等，但这些肿瘤标志物的敏感性和特异性都不能完全满足临床需求。为了更多肝癌患者不被遗漏，需要开发新的肿瘤标志物。

肝癌诊断新型标志物

1、miRNAs

肝癌组织及循环血致癌性的miRNA包括miR-155、miR-221、miR-222、miR-21、miR-106a等；抑癌性的miRNA包括miR-122、miR-126、miR-375等。

关于HBV及HCV相关HCC中miRNA的表达有很多研究。近年来非病毒相关HCC占比逐渐增加，导致其临床应用具有局限性。

2017年08月02日，CFDA批准“7种微小核糖核酸（microRNA）检测试剂盒（PCR荧光探针法）”医疗器械注册许可证，但是由于检测便利性、成本、敏感性、特异性等问题，并未在临床广泛使用。

2、LncRNAs

LncRNAs参与体内多种生命过程，可应用于肝癌诊断。取不同病因导致的HCC肿瘤组织标本，筛查之后发现，不同病因的HCC中，LncRNAs表达改变有显著区别。

研究显示^[1]，HBV相关HCC特征LncRNAs有PCAT-29，HCV相关HCC特征LncRNAs包括aHIF、PAR5，HDV相关HCC特征LncRNAs有Y3。

3、ctDNA

HCC一旦发生，肝癌肿瘤细胞的DNA可能进入血液循环，即ctDNA。有研究显示^[2]，在HCC发生时，ctDNA升高；外科切除或介入治疗后，ctDNA可以降低到正常；肝癌复发后，ctDNA将再次升高。

ctDNA检测在早期癌症、治疗监测或肿瘤残留检测中尚无临床实用（clinicalutility）证据，临床有效性（clinical validity）证据也较少。除了临床试验外，还没有证据表明ctDNA检测对癌症筛查有效，因此其仍处于研究阶段，并未获得国家认可的临床检测应用。

4、CTCs

循环肿瘤细胞（CTCs）是指进入到血液循环中的肿瘤细胞。肿瘤细胞不仅可以从实体瘤原发灶或转移灶脱落入血，也可在形成可见实体瘤病灶之前入血。因此，CTCs检测有可能早于影像学发现或早于临床表现。

但由于CTCs捕获技术尚未成熟，容易造成漏检，且检测可重复性差，临床应用并不广泛。

5、外泌体

外泌体是细胞分泌或者脱落的囊泡状小体，携带着癌细胞的DNA、RNA和蛋白质等信息，通过分析外泌体可以直接获得癌细胞的基本信息，因此可作为癌症的诊断工具。

与CTCs相比，外泌体检测需要采集的血液较少；即使在冷库里保存30年的血液，也可以用于分离和检测外泌体，因而具备一定优势。

6、自身抗体

肿瘤病人血清中存在各种类型的抗细胞自身抗原的抗体，这些与肿瘤发生有关的抗原被称为肿瘤相关抗原（TAA），相关的抗体称为肿瘤相关抗原自身抗体。单个TAA诊断HCC的特异度较低，而TAA-array能够有效提高HCC诊断效率。

7、鞘脂类化合物

复合脂质是细胞膜的主要成分，也是重要的第二信使分子，具有调节细胞增殖、转化、迁移等功能。信使分子鞘脂代谢紊乱参与肝癌的发病过程。目前已有研究发现了HCC相关鞘脂，有待进一步临床验证。

8、糖蛋白

人体血清中糖蛋白主要由肝脏等器官合成，糖蛋白聚糖结构与数量的异常，往往可以反映肝脏病变。实际上，临床常用的肝癌标志物AFP、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）、DCP等都是糖蛋白。

有研究^[3]显示，在慢性肝病进展至HCC过程中，患者血清中糖链发生异常变化，通过血清糖链图谱可全面反映肝脏疾病的特征。

糖链作为新型糖组标志物，独立于传统肿瘤标志物，创新医疗器械——糖链检测试剂盒（G-Test）已经应用于临床研究。部分临床数据显示，G-Test灵敏度达85%，特异度达93%；86%的AFP阴性HCC漏检患者，G-Test为阳性；G-Test对早期HCC同样具有较高的灵敏度，达到80%以上。

总结

各类肝癌标志物比较：

标志物类型	特点	技术方法	样本量	实验室要求	时效	灵敏度/特异度
糖链	非常稳定无需富集	荧光毛细管电泳法（G-Test）	很少，仅需2μL血清	普通实验室	当天	高，均大于80%
miRNA	不稳定需富集	荧光PCR	多，1mL左右血浆	易污染，需要PCR实验室	5-7天	高，均大于80%
ctDNA	不稳定需富集	NGS和WGS等高通量测序	很多，5-10mL外周血全血	易污染，需要PCR实验室	5-7天	高，均大于80%
蛋白质	不稳定无需富集	化学发光或时间分析荧光免疫分析法	较多，20-50μL血清	普通实验室	当天	灵敏度小于80%，特异度大于80%

AFP是目前最常用肿瘤标志物，在亚太地区广泛应用；

AFP阴性肝癌诊断标志物亟需研究；

新型诊断标志物需要进一步研究、验证。

参考文献

[1] ZHANG Q, MATSUURA K, KLEINER DE, et al. Analysisof long noncoding RNA expression in hepatocellular carcinoma of different viraletiology［J］. J Transl Med, 2016, 14(1):328.

[2] Tang JC，Feng YL，GuoT，et al.Circulating tumor DNA in hepatocellularcarcinoma: trends and challenges［J］.Cell Biosci，2016，6：32.

[3] Xue-En L , Liesbeth D , Chun-Fang G , et al.N-glycomic changes in hepatocellular carcinoma patients with liver cirrhosisinduced by hepatitis B virus[J]. Hepatology (Baltimore, Md.), 2015, 2007年46卷5期:1426-35页.