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一、标本采集
（一）标本采集
采集标本前应禁欲3～5d，采前排净尿液；将一次射出的全部精液直接排入洁净、干燥的容器内（不能用乳胶避孕套）。采集微生物培养标本须无菌操作。
（二）标本运送
精液采集后应立即保温送检（＜1h）。温度低于20℃或高于40℃影响精子活动。
（三）标本采集次数 一般应间隔1～2周检查一次，连续检查2～3次。
二、理学检查
（一）精液外观和气味
1.正常
刚射出的精液一般为微混浊的灰白色，有一股腥味，自行液化后为半透明的乳白色。
2.异常
（1）红色：前列腺和精囊腺炎症、结核、肿瘤或结石等。
（2）黄色：前列腺炎、精囊炎等。
（二）精液量
1.方法
通常用规格为10ml刻度吸管测定精液全量。
2.正常
一次排精量为2～6ml，平均3.5mL。
3.异常
精液量少于1ml或大于8ml，为异常，不利于生育。
（三）精液液化时间
新排出的精液从胶冻状转变为流动状态所需的时间，室温下正常精液排出后30分钟内自行液化。
●观察凝固
●37℃水浴
●5min查1次至液化
精液超过60min仍未液化为异常，常见于前列腺炎。
（四）精液黏稠度
系指完全液化后的精液黏度。
检测方法
1.直接玻棒法：将玻棒插入精液标本，提棒时可拉起黏丝，正常精液黏丝长度不超过2cm。黏稠度增加时，精液悬滴可形成长于2cm的长丝。
2.黏度计法：测定0.5ml精液通过黏度计所需的时间即为精液黏稠度。
3.临床意义
（1）黏稠度增加：精液常伴不液化，影响精子活力。
（2）黏稠度下降：见于先天性无精囊腺及精子浓度太低或无精子症。
（五）精液酸碱度（pH）
1.检测方法
用精密pH试纸或酸度计测定，应在射精后1h内完成。
2.临床意义
正常精液pH为7.2～7.8。
（1）pH值＜7.0，伴少精症，常反映输精管道阻塞、先天性精囊缺如或附睾病变。
（2）pH值＞7.8，常见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎。
三、化学检査
（一）精浆果糖测定
1.测定方法及评价
①间苯二酚比色法（国内常用）：9.11～17.67mmol/L；
②吲哚显色法：每次射精≥13μmol/1次射精，本法为WHO推荐方法。
2.临床意义
①先天性精囊腺缺如，果糖为阴性。
②精囊腺炎时，果糖含量减低。
③在无精症和射精量少于1ml者，若精浆中无果糖为精囊阻塞；有果糖，则为射精管阻塞。
（二）精浆α-葡糖苷酶测定
1.测定方法及评价
比色法可测定精浆中α-葡糖苷酶的活性。葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成量，反映α-葡糖苷酶的活性。国内临床上较为常用。
2.临床意义
α-葡糖苷酶活性下降，见于阻塞性无精子症，具有肯定性诊断价值。 （三）精浆乳酸脱氢酶同工酶X（LD-X）测定
1.测定方法及评价
LD-X的电泳位置在LD3-LD4之间。活性测定多采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、酶联染色及光度计扫描法，求得其相对百分率。国内临床上较为常用。
2.参考值 LD-X相对活性≥42.6%。
3.临床意义
精子发生缺陷时无LD-X形成。少精或无精者可致LD-X活性减低。
（四）精浆酸性磷酸酶测定（ACP）
1.参考值
80～1000U/ml（速率法）；＞200U/1次射精
（β-硝基酚法）。
2.临床意义
前列腺炎时ACP活性减低；前列腺癌和前列腺肥大时，ACP活性增高。
四、显微镜检查
（一）涂片检查
精液液化后，取1滴混匀的精液置于载玻片上，通常在低倍镜下粗略观察有无精子，是活动还是不活动。若遇无精子症，应将标本在600g下离心15min后取沉淀物重复检查。
（二）检测指标
1.精子活动率 对精子活力的定性检查
（1）方法：取液化均匀的精液1滴置载玻片上，加盖玻片放置片刻，在高倍镜下观察100个精子，计数活动精子与不活动精子的比例即为精子的活动率。
（2）参考值：正常人精液在排精30～60min内，精子活动率80%～90%，应至少＞60%。
2.精子存活率 对精子存活率的观察。
（1）检测方法：取液化均匀的精液1滴置载玻片上，加等量染色液（伊红Y、台盼蓝等）混匀，放置片刻，推成薄片，在高倍镜下观察计数100个精子中不着色精子与着色精子的比例，即为精子存活率。一般精子死亡后，细胞膜完整性受损，失去屏障功能，易于着色。
（2）参考值：有生育力男性精子存活率应≥58%。 3.精子活动力
指精子向前运动的能力，是直接反映精子质量的一项指标。
（1）检测方法：取液化均匀精液1滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察5～10个视野，计数100个精子并进行活动力分级，以百分率表示。
（2）结果判断：WH0建议将精子活动力分为4级：a.快速前向运动（Ⅲ级：直线运动）；b.慢或呆滞的前向运动（Ⅱ级：运动缓慢）；c.非前向运动（Ⅰ级：原地运动）；d.不动（0级：不活动）。
（3）参考值：WHO规定正常生育者精子活动力：射精后60min内，Ⅲ级精子应＞25%；或Ⅲ和Ⅱ级精子的总和＞50%。
（4）临床意义：精子活动力减低，精子存活率减低，0级、Ⅰ级精子40%以上，见于精索静脉曲张、泌尿生殖系感染如前列腺炎等及使用某些药物如抗疟药、雌激素等。 （三）精子计数
指单位体积中精子数，即精子浓度。精子计数乘以1次射精量，即1次射精精子总数。
测定方法及评价：
1.粗略估计法：取液化均匀的精液1滴置载玻片上，盖上盖玻片，放置片刻，在高倍镜下观察5个视野，取每个视野的精子平均数×109，即为大概精子数。该法操作简便，但只能作粗略估计。
2.精确计数法：
①血细胞计数板计数：只能用于精子数量观察，不能同时进行精子活动率和活动度、运动轨迹和速度的检查等。
②Makler精子计数板：简便、快速，精液不需要稀释，一次加样不但可计数精子密度，还可分析精子的活动力和活动率。
③计算机辅助精液分析（CASA）：CASA系统是利用图像和计算机视屏技术来进行精子计数，利用CASA计数精子简单、快速，但易受精液中细胞成分和非精子颗粒物质的影响。
3.参考值
精子总数≥39×106/次
精子浓度≥15×109/L
4.临床意义
精子数量减低可见于：①精索静脉曲张；②先天性或后天性睾丸疾病，如睾丸畸形、萎缩、结核、淋病、炎症等；③输精管或精囊缺如；④重金属损害，如铅、镉中毒或放射性损害；⑤某些药物，如抗癌药等或长期服用棉酚；⑥50岁以上男性精子数逐年减少。 （四）精子形态检查
1.正常形态：正常精子形似蝌蚪状，由头、体（颈、中段）、尾三部分构成。头部正面呈卵圆形，侧面呈扁平梨形；体部轮廓直而规则，长约5～7μm，宽1μm；尾部细长，一般长约50～60μm。
2.异常形态：①头部异常：包括大头、小头、锥形头、梨形头、无定形头等；②体部异常：主要指肿胀和不规则；③尾部异常：包括短尾、多尾、发夹状尾及断尾等。
3.临床意义
正常精液中异常精子应＜20%，超过40%，即影响精液质量，超过50%常可导致不育。感染、外伤、高温、放射线、酒精中毒、药物和精索静脉曲张均可使畸形精子数量增加。 （五）其他细胞
1.未成熟生殖细胞
参考值：未成熟生精细胞＜1%。
临床意义：曲细精管受损（如药物或其他因素），精液中可出现较多的未成熟生精细胞。
2.红细胞、白细胞、上皮细胞
（1）红细胞（偶见）和白细胞：正常＜5/HP。在生殖道炎症、结核、恶性肿瘤时，精液中红、白细胞数可增高。
（2）上皮细胞：正常偶尔可见前列腺上皮细胞，增多见于前列腺增生。
3.癌细胞
精液中查见癌细胞对生殖系恶性肿瘤的诊断将提供重要依据。
五、免疫学检查
抗精子抗体检查方法
1.混合抗免疫球蛋白试验（MAR）
2.免疫珠试验
3.精子凝集试验（SAT）
六、微生物学检查
七、精子功能检查 精子低渗肿胀试验（HOS）
1.检查方法
将精子置入低渗溶液中，计算100～200个精子中出现肿胀的百分率。结果判断：a、b、c、d、e及f型（部分尾部肿胀）；g型（全尾部肿胀）。
2.参考值
g型肿胀精子率＞50%。
3.临床意义
精子尾部低渗肿胀试验可作为体外精子膜功能及完整性的评估指标，预测精子潜在的受精能力。有研究表明，不育症的精子尾部肿胀率明显减低。
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