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细胞模型 一、氧化应激应激源的选择： 1化学类应激源： 1) 最常用的为过氧化氢。普遍用于探究自由基介导的细胞损伤机制及抗氧化剂对氧化损伤的保护和修复机制。 2) 自由基引发剂：一些物质可诱发自由基的产生，因此也可作为应激源，如AAPH、t-BHP等。 3) 治疗药物如阿霉素等。（许多抗癌药的作用原理都是引起细胞的氧化应激损伤） 2物理类应激源： 紫外、辐照、空气颗粒物等 3生物类应激源： 如低密度脂蛋白、糖分（可通过糖剥夺建模）等 二、氧化应激细胞模型等判断指标 构建成功的判断标准是引起细胞氧化应激的同时对细胞造成较小的损伤（实验组与对照组相比ROS水平升高，实验组与对照组比细胞存活率没有明显差异）。 判断指标：MTT、CCK8等测定细胞存活（通常做法为利用将细胞铺到96孔板中，用不同浓度应激源处理相同时间后检测细胞活性）；流式检测凋亡情况，WB检测凋亡marker变化情况；DCFDA法测定ROS（最直接的方法，DCFDA是一种通用的氧化应激指示剂。具细胞膜渗透性，本身无荧光。一旦进入细胞后，被细胞酯酶水解生成2',7'-二氯二氢荧光素，之后被快速氧化生成强荧光产物2',7'-二氯荧光素，可用荧光光谱检测（Ex/Em= 504/529nm）。）；抗氧化酶的活性；TBARS法测定脂质过氧化物的量 动物模型 1非特异性模型：即对动物体全身造成氧化损伤，又称为衰老模式，可通过辐照、半乳糖注射、臭氧环境中养殖等方法实现 2特异性模型：对动物体某个部分造成靶性损害 |
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