Cytoskeleton肌动蛋白（牛心脏 muscle）实验原理科普

Cytoskeleton肌动蛋白（牛心脏 muscle）实验原理科普：

1、Cytoskeleton肌动蛋白（牛心脏 muscle）来源

用Pardee和Spudich法从牛心肌中纯化肌动蛋白。牛心脏肌动蛋白由84%的α心脏肌动蛋白和16%的α骨骼肌动蛋白亚型组成，分子量约为43 kDa。牛心脏肌动蛋白纯度大于99%，以白色冻干粉末的形式提供。

2、Cytoskeleton肌动蛋白（牛心脏 muscle）储存

短暂离心以收集管底部的产品。冻干蛋白质在4°C条件下干燥至<10%湿度时，可稳定储存6个月。应使用100l蒸馏水将蛋白质重组至10 mg/ml。然后将蛋白质放入以下缓冲液中：5 mM Tris-HCl pH 8.0、0.2 mM CaCl2、0.2 mM ATP、5%（w/v）蔗糖和1%（w/v）右旋糖酐。然后将浓缩的蛋白质等分为实验量，在液氮中快速冷冻，并在-70°C下储存。如果在-70°C下储存，蛋白质可稳定6个月。对于工作浓度，应使用普通肌动蛋白缓冲液进一步稀释蛋白质，补充0.2 mM ATP和0.5 mM DTT。肌肉肌动蛋白是一种不稳定的蛋白质，应小心处理，避免反复的冻融循环。

3、Cytoskeleton肌动蛋白（牛心脏 muscle）实验设备

（1）4°C下的微凝胶

（2）Beckman Airbuge和Ultra Clear 离心管，贝克曼超离心机和SW 55钛转子超清晰 离心管（类别#344718）和适配器（第356860类）或其他能够以100000 x g离心200l的超离心机。

（3）分光光度计能够在600℃下测量吸光度纳米。