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选择特异性——如何选择合适的亲和纯化二级抗体？本文为第4部分内容：选择特异性。 以下术语解释可能有助于为实验选择较为合适的抗体特异性。 注：不同物种的免疫球蛋白具有相似的结构，相似性与系统发育密切相关。来自一个物种的免疫球蛋白抗体可能与许多其他物种发生交叉反应，除非它们已被特异性吸附到交叉反应物种上。已被其他物种吸附的抗体将在抗体描述中包含“（最小X…Sr Prot）”。 Jackson 抗IgG（H+L） 这些抗体与IgG分子的重链和轻链反应，即与IgG的Fc和F（ab’）2/Fab区域反应。抗IgG（H+L）抗体也与其他免疫球蛋白类（IgM、IgA、IgD、IgE）和亚类反应，因为它们都共享相同的轻链（kappa或lambda）。抗IgG（H+L）抗体比抗片段特异性抗体具有更广泛的表位识别。建议用于所有常规免疫检测程序。 抗IgG，轻链特异性 这些抗体与IgG和其他免疫球蛋白共享的轻链反应。它们被开发用于促进免疫沉淀（IP）后在蛋白印迹上检测50kDa左右的蛋白质，并且不与IgG重链反应。 这些抗体与IgG的F（ab’）2/Fab部分反应。它们已通过ELISA检测和/或吸附Fc片段。它们对IgG没有特异性，因为它们与轻链反应，因此也与其他免疫球蛋白类（IgA、IgM、IgD和IgE）和共享相同轻链的亚类反应。 Jackson 抗Camelid IgG，VHH域 这些抗体与羊驼和骆驼IgG亚类2和3的VHH结构域发生反应。 抗IgG、Fc/Fcγ片段特异性 这些抗体与IgG重链的Fc部分反应。已通过ELISA检测和/或吸附Fab片段。在某些情况下，对其进行额外测试和/或吸附，以最小化与IgM和/或IgA的交叉反应。在这种情况下（抗人、抗鼠和抗鼠），它们被标记为“anti-IgG，Fcγ”。 注意：抗IgG、Fcγ片段特异性抗体与所有单克隆一级抗体的反应并不相同。对于对四个IgG亚类具有平衡反应性的抗小鼠IgG、Fcγ片段特异性抗体，选择山羊抗小鼠Ig G（1+2a+2b+3亚类）、Fcβ片段特异性（min X Hu、Bov、Rb Sr Prot）。 抗鼠IgG，Fcγ亚类特异性 这些抗体与小鼠IgG各亚类重链的Fc部分反应。通过ELISA检测和/或吸附，以最小化与其他亚类、Fab片段和IgM的交叉反应；人、牛和兔血清蛋白。抗小鼠IgG、Fcγ亚类特异性抗体与小鼠IgG的各个亚类反应。它们用于在多重标记实验中区分小鼠IgG初级抗体的不同亚类，或用于IgG亚类的测定 抗IgG+IgM（H+L） 这些抗体与IgG和IgM的重链反应。它们还与免疫球蛋白之间共享的轻链反应，因此它们也可能与IgA、IgD和IgE反应。 抗人IgA+IgG+IgM（H+L） 这些抗体与人IgA、IgG和IgM的重链反应。它们还与人类免疫球蛋白之间共享的轻链反应，因此它们也可能与IgD和IgE反应。 抗IgM、μ链、Fc5μ片段特异性 这些抗体与IgM重链反应（在抗人的情况下，仅与重链的Fc5μ部分反应）。它们已通过ELISA检测和/或吸附抗IgG。额外测试和/或吸附抗人IgM，Fc5μ，以最小化对IgA的交叉反应。 抗人血清IgA，α链特异性 这些抗体与人类IgA重链反应。它们已通过ELISA检测和/或吸附，以最小化与人IgG和IgM的交叉反应。 其他特性 抗荧光素、抗HRP、抗生物素可用于标记内源性蛋白质或核酸探针，并用于信号增强或信号转换。
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