胆红素含量的测定

​胆红素含量的测定

胆红素含量的测定分为四个阶段:标准溶液和供试液的配制，标准曲线的绘制和试品的测定及含量的计算。

第一步:胆红素标准溶液和供试液配制。

在天平上精确称取胆红素0。01克，试品(就是欲测含量的胆红素)001克，分别再以95%浓度的乙醇稀释至50毫升刻度，此时标排溶液每毫升相当于0。00002克胆红素。

第二步:胆红素标准曲线的绘制。

精确吸取胆红素标批溶液0、1、2、345毫升到带色试管中，分别加入95%浓度乙醇9、87、8、5、4毫升，使各带色试管为9毫升，再加入重氮化试剂1毫升，混合均匀，在20℃度处化静放1小时，再在波长520纳米处测定光密度，并以光密度为纵坐标，各量所含胆红素浓度为横坐标，作出标准曲线。

重氮化试剂的配制，溶液A:对氮基苯磺酸1克，加浓盐酸15毫升，加水985毫升溶液B;0.5%浓度亚硫酸钠溶液。临用重氮化试剂时，可取10毫升 A溶液，加0。3毫升B溶液混匀即得。

第三步:胆红素试品的测定。

取供试液3毫升，加入5%浓度乙醇6毫升，重舞化试剂1毫升，混匀。在暗处测定光密度，从标准曲线查得胆红素的毫克数。

第四步:含量计量公式。

样品胆红素含量测定计算公式:样品胆红素含量%=(标准曲线上查得的胆红素x100x5)+(样品毫克数x30x100%。