积雪草提取物抑制小鼠体外脑单胺氧化酶A的活性

来源：医生在线

日期：2007-03-05

积雪草提取物抑制小鼠体外脑单胺氧化酶A的活性
　　军事医学科学院院刊2000年第24卷第2期
张中启　袁莉　罗质璞
　　关键词：积雪草提取物；单胺氧化酶A
　　积雪草(Herba Centellae cum radice)属伞形科(Umbelliferae)属植物，广泛分布于我国华东、中南及西南地区，具有清热利湿、消肿解毒的功效^［1］。现代药理研究表明，积雪草所含的三萜皂苷对大小鼠均有镇静安定作用，在印度传统草药中被广泛用于精神病、癫痫及癔病的治疗。为了解积雪草是否具有抗抑郁作用机制，我们对积雪草提取物影响小鼠体外脑单胺氧化酶A活性的作用进行了研究。
　　1　材料和方法
[-hzh-] 　　1.1　动物
　　昆明种小鼠，雄性，体重20～26 g，由本院实验动物中心提供。
　　1.2　试药
　　积雪草提取物为灰白色粉剂，由本所植化室提供，吗氯贝胺系我所合成室提供，¹⁴C-5-HT（5-hydroxytryptamine）购于Amershem公司。Na₂HPO₄, kH₂PO₄, HCl，甲苯，二甲苯，乙酸乙酯，由本院提供。
　　1.3　小鼠体外脑单胺氧化酶-A（MAO-A）活性的测定
　　动物断头处死后，迅速取出全脑，称重，按1∶14（质量/体积）的比例加入冰冷的0.1 mol/L KH₂PO₄/Na₂HPO₄缓冲液（pH7.4），用玻璃组织匀浆器匀化1 min，制成匀浆（酶原）备用。
　　取脑匀浆100 μl加0.1 mol/L Na₂HPO₄/KH₂PO₄缓冲液100μl，药物50 μl，在37℃保温5 min后，加底物50 μl（¹⁴C-5-HT，10.36 mBq/mmol）；反应体系总体积为300 μl，在37℃下继续保温20 min，然后加入2 mol/L HCl 250 μl 终止反应。加入4 ml甲苯/乙酸乙酯（1∶1，体积比）混合液，剧烈振荡10 min后3 000 g离心5 min。取有机层1.5 ml加入5 ml闪烁液（500 ml二甲苯中含1.5 g PPO，0.15 g POPOP）中计数。
　　1.4　统计学处理
　　三组积雪草提取物的数据在单因素方差分析后，进行Dunnett t检验；以吗氯贝胺为阳性对照物，统计方法仅采用t检验。
　　2　结果与讨论
　　表1结果表明，积雪草的三种提取物均以剂量依赖性的方式显著抑制小鼠体外脑单胺氧化酶A的活性，其中以50%醇提物抑制效果最佳，在剂量50μg/μl时的抑制程度与抗抑郁剂吗氯贝胺（单胺氧化酶A抑制剂）5μg/μl时相当，抑制率均达80%以上。
表1　积雪草提取物对小鼠体外脑单胺氧化酶A（MAO-A)
　　活性的影响

组别	剂量(ρB/μg．μl-1)	MAO-A活性	抑制率（%）
对照	—	100±9	—
吗氯贝胺	5	15±3***	85
95%醇提物	5	100±4	0
	12.5	73±5**	27
	50	46±19**	54
50%醇提物	1	73±9	27
	5	56±7**	44
	12.5	36±3**	64
	50	17±3**	83
水提物	5	95±5	5
	12.5	79±5**	21
	50	37±3**	63

　　n=4, ±s；** p＜0.01，*** P＜0.001与对照组比较　　最近有文献报道积雪草能明显减少小鼠在强迫性游泳抑郁模型中的不动时间。本文也首次发现，积雪草提取物具有抑制小鼠体外脑单胺氧化酶A的活性，提示积雪草可能具有抗抑郁作用。
　　［作者简介］张中启(1963-)，男，安徽安庆人，助理研究员，硕士。
　　张中启(军事医学科学院毒物药物研究所，北京　100850)
　　袁莉(军事医学科学院毒物药物研究所，北京　100850)
　　罗质璞(军事医学科学院毒物药物研究所，北京　100850)
　　参考文献
　　［1］汤以佳，于树仁.积雪草提取液的精神神经药理学研究［J］.国外医药植物药分册,1991，6（3）： 133.