第3章水平测试第3章 水平测试本试卷分第Ⅰ卷(选择题)和第Ⅱ卷(非选择题)两部分，满分100分，考试时间90分钟。第Ⅰ卷 (选择题，共45分
)一、单项选择题(共15小题，每小题2分，共30分。每题给出的四个选项中，只有一个选项是符合题目要求的)1．下列有关基因工程的叙述
，错误的是( )A．基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异B．在同一DNA分子中，限制酶的识别序列越长，酶切
割位点出现的概率越大C．基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入D．以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2＋处理细胞
以使其处于感受态解析 基因工程能打破生殖隔离，并定向地改变生物的遗传特性，A正确；限制酶的识别序列越长，酶切位点出现的概率越小，B
错误；作为目的基因的载体，其上应有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入，C正确；用Ca2＋处理微生物如大肠杆菌的细胞，能使
其处于易于接受外源基因的生理状态，即感受态，D正确。2．基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是( )A．
工具酶、目的基因、载体、受体细胞B．重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶C．模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D．目的基因
、限制酶、载体、受体细胞解析 基因工程是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因(目的基因)选择出来，然后放到另一种生物的细胞(受体细
胞)里，定向地改造生物的遗传性状。基因操作的工具酶是限制酶和DNA连接酶，基因进入受体细胞的运输工具是载体，A正确。3.质粒是基因
工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如右图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基
因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置(插入点有a、b、c)，请根据表中提供细菌的生长情况，推测
①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是( )A．①是c；②是b；③是aB．①是a和b；②是a；③是bC．①是a和b；
②是b；③是aD．①是c；②是a；③是b解析 外源基因插入c点，不破坏抗青霉素基因和抗四环素基因，外源基因插入b点破坏抗四环素基因
，外源基因插入a点破坏抗青霉素基因，A正确。4．DNA粗提取实验中，应尽可能避免DNA断裂和降解，下列相关操作可达到此目的的是(
)A．以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进DNA溶解B．将玻璃棒搅拌得到的丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中C．以血
液为实验材料时，可加入柠檬酸钠D．向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌解析 适当加热不会促进DNA溶解，A错误；将玻璃
棒搅拌得到的丝状物(DNA)溶于2 mol/L的NaCl溶液中，目的是为了下一步加入二苯胺试剂发生颜色反应，B错误；以血液为实验材
料时，可加入柠檬酸钠，以防止血液凝固，但这并不能避免DNA断裂和降解，C错误；DNA不溶于酒精，因此可向DNA溶液中加入体积分数为
95%的冷酒精，并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA，缓慢搅拌可有效避免DNA断裂，冷的酒精可以降低DNA水解酶活性，D正确。5．下列有
关体内DNA复制与PCR比较的叙述，错误的是( )A．二者子链的延伸方向相同，均为5′端→3′端B．二者均需要解旋酶破坏氢键来实
现解旋C．体内DNA复制需要能量，PCR反应也需要能量D．二者遵循的碱基互补配对方式相同解析 DNA体内复制与利用PCR扩增DNA
时，子链的延伸方向相同，均为5′端→3′端，A正确；PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，在高温条件下氢键断裂，B错误；DNA体
内复制与利用PCR扩增DNA时都需要能量，但两者所需能量来源不同，C正确；DNA体内复制与利用PCR扩增DNA时，遵循的碱基互补配
对方式相同，D正确。6．基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性内切核酸酶的酶切位点如图所示。
下列分析错误的是( )A．构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体B．构建重组DNA时，
可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体C．图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸
基团D．用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA解析 由题图知，BglⅡ、S
au3AⅠ及EcoRⅠ三种酶在目的基因和P1噬菌体上都有切割位点，故可用BglⅡ和Sau3AⅠ或EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基
因所在片段和P1噬菌体载体，A、B正确；从图乙知P1噬菌体载体为环状DNA，只用EcoRⅠ切割后产生1个链状DNA，其两条链反向双
螺旋，有2个游离的磷酸基团，C正确；用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，可能形成目的基因—目的
基因、目的基因—载体、载体—载体3种重组DNA，D错误。 7．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以
使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( )A．大肠杆菌 B．酵母菌C．T4噬菌体 D．质粒DNA解析 人的糖蛋白必须
经内质网和高尔基体进一步加工合成，故受体细胞内应有内质网和高尔基体，题干中只有酵母菌符合此条件，B正确。8．采用基因工程的方法培养
抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是( )①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中 ③将编码
毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组织培养 ④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花
子房，并进入受精卵A．①② B．②③ C．③④ D．①④解析 将毒素蛋白直接注射到棉受精卵中，受精卵没有获得目的基
因，子代细胞不会有抗虫性状，①错误；将编码毒素蛋白的DNA序列直接注射到棉受精卵中，而没有将目的基因与载体结合，这样目的基因是不会
被保留下来的，很容易被水解掉，②错误；在植物基因工程中，可利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，然后通过植物组织培养技术将植物细
胞培养成完整植株，③正确；在植物基因工程中，可以利用花粉管通道法将目的基因导入受精卵中，然后发育为转基因植株，④正确。9．农杆菌中
的Ti质粒是植物基因工程中常用的载体，相关叙述正确的是( )A．Ti质粒是能够自主复制的单链DNAB．Ti质粒中磷酸基团都与两个
脱氧核糖相连接C．重组Ti质粒的受体细胞只能是植物愈伤组织细胞D．Ti质粒上的基因可全部整合到受体细胞染色体上解析 Ti质粒是能够
自主复制的双链环状DNA分子，其分子内部的磷酸基团都与两个脱氧核糖相连接，A错误，B正确；重组Ti质粒的受体细胞可以是植物愈伤组织
细胞，也可以是植物的其他细胞，如植物的受精卵细胞，C错误；Ti质粒上有一段T-DNA，目的基因插入Ti质粒上的T-DNA 中导入农
杆菌，让农杆菌侵染植物，农杆菌的Ti质粒上的T-DNA片段(内有目的基因)可整合到受体细胞的染色体上，D错误。10．下列哪一种方法
不能用于检测目的基因是否成功导入或表达( )A．显微镜下直接观察受体细胞中是否含有目的基因B．在含某种抗生素的培养基中培养导入了
重组质粒的大肠杆菌C．利用PCR等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNAD．提取受体
细胞蛋白质，利用抗原—抗体特异性反应进行检测解析 在显微镜下无法观察到基因，因此该方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达，A错
误。11．用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性内切核酸酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述错误的是( )
A．图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B．图2中酶切产物可用于构建重组DNAC．泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物D．图中被酶切
的DNA片段是单链DNA解析 两种限制酶切割位点不同，所以两种限制酶识别核苷酸的序列不同，A正确；限制酶切割的产物可用于构建重组D
NA，B正确；泳道①显示四个条带，是SalⅠ处理后的酶切产物的电泳结果，泳道②显示三个条带，是XhoⅠ处理后的酶切产物的电泳结果，
C正确；限制酶的作用特点是识别特定DNA序列，并在DNA两条链特定部位切割产生黏性末端或平末端，D错误。12．某研究小组为了研制预
防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是( )A．步骤①为目的基因的获取，获取方法还
有PCR扩增等B．步骤②需使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从能吸收周围环境中DNA分子
的生理状态恢复到常态D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性反应实验解析 由图可知，步
骤①所代表的过程是反转录获取目的基因，A正确；步骤②需使用限制性内切核酸酶和DNA连接酶，B正确；步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌
，使其细胞从常态转化为能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，C错误；Q蛋白作为抗原，患禽流感康复的鸡血清中有抗Q蛋白的抗体，所以检
验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性反应实验，D正确。13．上海医学研究所成功培育出第一
头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药用蛋白含量多达30多倍，以下与
此有关的叙述中正确的是( )A．转基因动物是指体细胞中出现了新基因的动物B．提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人
白蛋白基因C．只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的D．转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基
因，但不发生转录、翻译，故不合成人白蛋白解析 转基因动物是指体细胞中出现了外源基因的动物，A错误；提高基因表达水平是指设法提高牛的
乳腺细胞合成人白蛋白的能力，B错误；只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中选择性表达，C错误。14
．L-天冬酰胺酶对于治疗小儿白血病特别有效，但在临床应用中经常出现过敏反应。科研人员预期在L-天冬酰胺酶的基础上研发药效性强但免疫
性弱的蛋白质药物，下一步要做的是( )A．合成编码L-天冬酰胺酶的DNA片段B．构建含L-天冬酰胺酶基因片段的表达载体C．设计出
药效性强但免疫性弱的蛋白质结构D．利用DNA分子杂交的方法对表达产物进行检测15．基因工程在农牧业和医药卫生等方面具有广泛的应用，
并影响和改变着我们的生活，下列相关叙述错误的是( )A．从大肠杆菌培养液中提纯的胰岛素的生物活性与人体中的完全相同B．将肠乳糖酶
基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低C．利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药
品的生产问题D．利用基因工程可以培育无免疫排斥反应的克隆器官解析 大肠杆菌是原核生物，无内质网和高尔基体，不能对来自核糖体的蛋白质
进行加工处理，因此从大肠杆菌培养液中提纯的胰岛素的生物活性与人体中的不相同，A错误。二、多项选择题(共5小题，每小题3分，共15分
。每题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求)16．下图是培育抗冻番茄的过程示意图。下列相关叙述正确的是( )A．测
序技术以及遗传序列数据库的应用等有助于抗冻基因的筛选B．转基因抗冻番茄植株的获得是基因重组的结果C．重组质粒转入农杆菌的主要目的是
筛选目的基因D．可用PCR技术检测抗冻基因是否在番茄植株中表达解析 重组质粒转入农杆菌的主要目的是将抗冻基因(目的基因)导入受体细
胞，C错误；可用PCR技术检测抗冻基因是否插入番茄细胞的染色体的DNA上以及是否转录出mRNA，D错误。17．如图表示利用农杆菌转
化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法正确的是( )A．利用含有四环素的培养基可将含Ⅱ的细菌筛选出来B．Ⅲ是农杆菌，通过
步骤③将目的基因导入植株C．⑥可与多个核糖体结合，并可以同时翻译出多种蛋白质D．①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与解析 ⑥
是一个mRNA分子，可与多个核糖体结合形成多聚核糖体，由于翻译的模板是同一个mRNA分子，故翻译出的是同一种蛋白质，C错误。18．
科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并以质粒为载体，采用转基因的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种，下列有关说法中正确的是(
)A．质粒是最常用的载体之一，它仅存在于原核细胞中B．将抗枯萎病基因连接到质粒上，用到的工具酶仅是DNA连接酶C．用叶肉细胞作为
受体细胞培育出的植株能表现出抗枯萎病性状D．通过该方法获得的抗枯萎病金茶花，产生的配子不一定含抗枯萎病基因解析 质粒主要存在于原核
细胞中，在某些真核细胞中也有，如酵母菌，A错误；将目的基因连接到质粒上，不但要用到DNA连接酶，在连接之前还要用同种限制酶或能产生
相同末端的限制酶处理目的基因和质粒以得到相同的末端，B错误；用叶肉细胞作为受体细胞培育出的植株能表现出抗枯萎病性状，C正确；由于重
组质粒只结合在某条染色体上，转基因植株相当于一个杂合子，因此有的配子就没有目的基因，D正确。解析 ①过程是逆转录，利用逆转录酶合成
DNA片段，所以需要原料A、T、G、C，A正确；②过程是目的基因与质粒DNA的重组，需要用限制性内切核酸酶切断质粒DNA，再用DN
A连接酶将目的基因与质粒连接在一起，B正确；如果受体细胞是动物细胞，重组基因的导入常用显微注射法，农杆菌转化法多用于植物细胞，C错
误；④过程是基因的表达过程，该过程中会有RNA的合成，原料中含有A、U、G、C，D错误。20．下列关于基因工程和蛋白质工程的叙述不
正确的是( )A．蛋白质工程就是基因工程B．蛋白质工程利用了基因工程技术手段C．蛋白质工程生产的都是自然界存在的蛋白质D．基因工
程和蛋白质工程之间没有任何联系解析 蛋白质工程是在基因工程上延伸出来的第二代基因工程，可以创造新的、自然界中不存在的蛋白质。第Ⅱ卷
(非选择题，共55分)三、非选择题(共5小题，共55分)21．(10分)乙肝病毒是一种DNA病毒。中国的乙肝病毒携带者约占总人口
的10%。我国科学家通过基因工程生产出乙型肝炎病毒疫苗，为预防乙肝提供了有力的保障。请回答下列问题：(1)乙肝病毒专一侵染肝细胞的
原因是__________________________。(2)乙肝病毒的基因组可编码的蛋白质及功能如下：Core蛋白是外壳蛋白
；Pre-core与抑制宿主的免疫反应有关；X蛋白与病毒复制有关；S蛋白是病毒的包膜蛋白，与病毒进入细胞有关。通过基因工程生产的乙
肝疫苗的有效成分是上述病毒蛋白中的________________。肝细胞表面有乙肝病毒的受体 Core蛋白和S蛋白 2端开始连接
脱氧核苷酸 限制酶和DNA连接酶 质粒 解析 (1)由于肝细胞表面有乙肝病毒的受体，所以乙肝病毒专一侵染肝细胞。(3)据题图分析，
①表示从乙肝病毒分离有关抗原基因；②过程包括基因表达载体的构建，以及将目的基因导入细菌；③可用特定抗体筛选含目的基因的细菌，并作为
微生物发酵的工程菌。a.PCR技术中，需要2种不同的引物，使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。b.在构建基因表达载
体的过程中，需要使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶，常用的载体是质粒。c.为了提高将重组质粒导入细菌的转化效率，常用Ca2＋溶液处
理细菌，使之成为感受态细胞。22．(10分)样品DNA经PCR技术扩增，可以获取大量DNA分子克隆。在试管中进行DNA的人工复制(
如图)在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。据图回答下列问题：(1)PCR
技术的原理是__________________________，图中A过程表示____________。(2)某样品DNA中共含
3000个碱基对，碱基数量满足：(A＋T)∶(G＋C)＝1∶2，现欲得到100个与样品相同的DNA，至少需要向试管中加入_____
___个腺嘌呤脱氧核苷酸。DNA半保留复制 DNA解旋 99000 (3)A过程也称为DNA的变性，此过程在温度达到90 ℃以上时
才能完成，说明DNA分子具有________性。(4)由图中信息分析可知，催化C过程的酶是___________________，
它与正常细胞里的酶的区别是______________。热稳定 耐高温的DNA聚合酶 能耐高温 解析 (1)PCR技术是利用DNA
半保留复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数形式增加。PCR技术包含DNA受热变性解链、引物与单链相应互补序
列结合、延伸三个过程。(2)已知某DNA中共含3000个碱基对，碱基数量满足(A＋T)∶(C＋G)＝1∶2，则A共有3000×2×
1/6＝1000(个)，故通过PCR技术得到100个相同的DNA共需要添加A(100－1)×1000＝99000(个)。23．(1
0分)我国科学家屠呦呦因青蒿素的研究荣获2015年诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素是目前世界上最有效的治疗疟疾的药物，为青蒿植株的次级
代谢产物，其化学本质是一种萜类化合物，其生物合成途径如图1所示。正常青蒿植株的青蒿素产量很低，难以满足临床需求，科学家为了提高青蒿
素产量，将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达，获得了高产青蒿植株，过程如图2所示。(1)研究人员从棉花基因文库中
获取FPP合成酶基因后，可采用_______技术对该目的基因进行大量扩增，该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外，还需要提供_
_______、____________________等条件。(2)图2中的①为____________，形成过程中需要____
_______________等酶；棉花FPP合成酶基因能够和质粒连接成①的主要原因是___________ __________
__________________。(3)若②不能在含有抗生素Kan的培养基上生存，则说明_____________ _____
___________。(4)由题意可知，除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外，还可以通过哪些途径来提高青蒿素的产量？__
___________________________ ________________(试举一例)。PCR 引物 耐高温的DNA
聚合酶 基因表达载体 限制酶和DNA连接酶 限制酶切割后具有相同的黏性末端 重组质粒没有导入农杆菌抑制SQS基因的表达(或增强AD
S基因的表达)解析 (1)PCR技术可在体外快速扩增目的基因，PCR的条件：模板(目的基因)、原料(四种脱氧核苷酸)、引物、耐高温
的DNA聚合酶。(2)图2中的①为构建的基因表达载体，形成过程中需要限制酶切割目的基因和载体，再用DNA连接酶连接。由于棉花FPP
合成酶基因和质粒被切割后，具有相同的黏性末端，两者能够连接成①基因表达载体。(3)重组质粒中含有标记基因，若②不能在含抗生素Kan
的培养基上生长，说明重组质粒未导入农杆菌。(4)据图分析可知，FPP在ADS基因表达的情况下，生成青蒿素，因此要提高青蒿素的产量，
可以通过抑制SQS基因的表达或增强ADS基因的表达来提高青蒿素的含量。24．(12分)苏云金杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图
是转毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图。据图回答下列问题：(1)将图中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管
中有________种DNA片段。(2)假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现
用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗？________(填“能”或“不能”)，理由
是______________________。若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒________。A．既能被BamH
Ⅰ也能被HindⅢ切开B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开D．能被HindⅢ但不能
被BamHⅠ切开4能切割后的黏性末端相同 D(3)实际操作中常用_________________________法将重组质粒导入
植物受体细胞。种植转基因植物，它所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染。把目的基因导入植物的____________
_____________ DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是__________________________ ____
_________________________。花粉管通道法和农杆菌转化 叶绿体(或线粒体或细胞质) 叶绿体(或线粒体或细胞质
)中的基因不会通过花粉传给下一代25．(13分)生长激素在治疗激素分泌过少的矮小症方面有积极的作用，为了批量生产生长激素，可以采用
转基因技术将控制生长激素合成的基因转移到微生物细胞内。如表所示是涉及此转基因技术的几种限制酶识别序列及其切割位点；图1、图2中箭头
表示相关限制酶对质粒和供体DNA的切割位点，请回答下列问题：(1)四种酶的识别序列相比较，______酶的识别序列的结构相对稳定，
原因是_________________________________(从碱基种类含量角度分析)。(2)为了提高构建重组质粒的成
功率，你认为最好先用______________ ____________(填上表中酶的名称)处理质粒和目的基因，然后用_____
___酶拼接。本题构建重组质粒时绝对不能使用SmaⅠ的原因是_____________ _____________________
__________。具有三个氢键的G—C碱基对含量高 Ⅲ两种限制酶 DNA连接 会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(3
)为了检测目的基因是否成功翻译，可以用________________技术，若没有出现相应的杂交带，则可能需要用_________
___等技术来检测是否转录出mRNA。(4)受体细胞最好是选择____________________，以保证能够从工程菌中直接得
到具有生物学活性的人的生长激素。受体细胞的另外一种选择是制备“乳房生物反应器”，即以________________为受体细胞，进
而从奶牛的乳汁中提取人的生长激素。工程菌相对于“乳房生物反应器”的优点是_____________________________
____。抗原—抗体杂交 PCR 酵母菌等真核微生物 牛的受精卵 繁殖速度快、外源基因表达效率高 (5)胰岛素是人体内唯一有降血糖功能的激素，采用蛋白质工程可以对胰岛素进行改造，使之起效时间缩短，保证餐后血糖高峰和血液中胰岛素高峰一致。如果你是科研工作者，请完善研制速效胰岛素的思路：确定蛋白质的________→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→________________________→相对应的碱基序列。功能蛋白质应有的氨基酸序列 解析 (1)DNA分子中G—C碱基对间有三个氢键，故C—G碱基对越多结构越稳定。(2)虽然同一种限制酶切出的黏性末端相同，但是利用同一种限制酶切割目的基因与质粒，会出现自身环化或目的基因与质粒的反向连接现象。故切割目的基因和质粒时采用两种酶切割，可保证目的基因与质粒的准确连接，因此最好选用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶处理质粒和目的基因，然后用DNA连接酶连接。SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因，因此不能使用SmaⅠ切割。(3)目的基因是否成功翻译可借助抗原—抗体特异性结合的原理对蛋白质进行检测。检测目的基因是否转录出了mRNA，可采用PCR等技术。(4)原核生物中只有核糖体，可以形成蛋白质，但是没有内质网和高尔基体对蛋白质进行加工，生产出来的蛋白质可能没有活性，所以受体细胞最好为酵母菌等真核生物。制备“乳房生物反应器”时，应选用受精卵作为受体细胞，因为受精卵全能性高。工程菌具有繁殖速度快、外源基因表达效率高的优点。本课结束 |
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