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受伤的组织会引发一系列复杂而结构化的事件，以修复受损的组织区域这些事件可能包括血管生成因子增加血管化增殖和细胞外基质沉积，以及炎症免疫细胞的浸润破坏坏死组织的过程。伤口愈合过程开始于细胞向伤口，开始突出，迁移，并关闭伤口区域。这些过程反映了行为以及整个组织复合体。 多年来，研究人员一直采用伤口愈合试验来研究细胞极化、组织基质重塑，或估计不同细胞和培养物的细胞增殖和迁移率条件伤口愈合试验已用于研究细胞极性和肌动蛋白细胞骨架结构通过Rho家族GTP酶、微管和高尔基体定向的作用p53在细胞迁移以及其他生理过程中的作用。这些分析通常涉及培养融合细胞单层，然后通过刮擦线穿过单层。然后用显微镜检查该“伤口”产生的开口间隙随着时间的推移，细胞移动并填充受损区域。这种“治愈”效果可能需要几个小时这取决于细胞类型、条件和“受伤”区域的表面积。 这些“划痕”试验的缺点是缺乏明确的伤口表面积或间隙细胞之间。这些伤口的大小和宽度各不相同，这阻碍了一致的结果和产生井与井之间的差异。此外，“划痕”试验通常会对皮肤造成损伤这可以防止细胞迁移到伤口部位并愈合。 24孔细胞划痕试验试剂盒通过提供专有的可以产生限定的伤口场或间隙的经处理的插入物。培养细胞直至形成插入物周围的单层。移除插入物，留下精确的0.9 mm开放“伤口区域”在细胞之间。此时可对细胞进行处理并监测其迁移和增殖伤口区域。这些事件的进展可以通过固定在特定时间点或延时显微镜。 24孔细胞划痕试验试剂盒组分： 1.24孔伤口愈合测定板（零件号112001）：两个24孔板，包含12个伤口 字段插入每个（参见下图） 2.细胞染色液（零件号11002）：一瓶10mL 3.DAPI荧光染色（1000X）（零件号112002）：一个30µL小瓶 4.固定溶液（零件号122402）：一个20mL瓶 24孔细胞划痕试验试剂盒检测原理： 细胞选择™ 24孔伤口愈合分析试剂盒包含2 x 24孔板，每个板包含12专利处理塑料插件。插入物形成一个伤口区域，其定义间隙为0.9mm测量细胞的迁移和增殖速率。迁移细胞能够延伸突起并最终侵入并闭合伤口区域。细胞增殖和迁移速率可以是使用手动定影和显微成像确定。提供用于停止的固定解决方案细胞在特定时间点。还提供了细胞染色和DAPI染色，以便用光观察结果和荧光显微镜。
文献参考： 1. Ridley AJ, Schwartz MA, Burridge K, Firtel RA, Ginsberg MH, Borisy G, Parsons JT, Horwitz AR. (2003) Science 302, 1704-9. 2. Horwitz R, Webb D. (2003) Curr Biol. 13, R756-9. 3. Lauffenburger DA, Horwitz AF. (1996) Cell 84, 359-369. |
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