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TBARS（TCA法）测定试剂盒提供了一种简单、可重复和标准化的工具，用于测定血浆、血清、尿液、组织匀浆和细胞裂解物中的脂质过氧化。在高温（90-100°C）和酸性条件下，通过MDA和TBA反应形成的MDA-TBA加合物在530-540 nm处进行比色测定，或在530 nm激发波长和550 nm发射波长下进行荧光测定（见下图1）。尽管该反应在荧光测量时具有高得多的灵敏度，但提供了两种方法的方案。
硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)检测试剂盒试剂准备： 1.硫代巴比妥酸测定试剂-（编号700871） 小瓶中含有1g硫代巴比妥酸（TBA）。它可用于制备颜色试剂。 2.TBA乙酸-（编号700872） 小瓶中含有10毫升浓乙酸。小心地将10ml TBA乙酸稀释到40ml HPLC级水中。该稀释的乙酸溶液用于制备显色剂。稀释的乙酸溶液在室温下稳定至少三个月。 3.氢氧化钠含量测定试剂（3.5 M）-（编号700017） 小瓶中含有10ml 3.5M氢氧化钠（NaOH）。用40 ml HPLC级水稀释10 ml氢氧化钠含量测定试剂（3.5 M）。该稀释的NaOH溶液用于制备显色剂。稀释的NaOH溶液在室温下稳定至少三个月。将稀释的NaOH溶液储存在适合腐蚀性材料的塑料容器中。 4.TBA丙2醛标准品-（编号10009202） 小瓶中含有1 ml 500µM的水中丙2醛（MDA）。它可用于准备标准曲线。 5.TCA分析试剂（10%）-（编号700016） 小瓶中含有10毫升10%三氯乙酸（TCA）。该溶液已准备好使用。 6.准备颜色试剂： 以下颜色试剂量足以评估24个样品/标准品。如果要分析更多或更少的样品，则相应地调整体积。称取106 mg TBA（编号700871），并将其加入含有10 ml稀释TBA乙酸溶液的烧杯中。加入10ml稀释的氢氧化钠并混合，直到TBA完全溶解。溶液稳定24小时。 硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)检测试剂盒样品制备： 血浆 通常，正常人血浆的脂质过氧化物水平（以MDA表示）为0.26-3.94µM，1,8,11 1.使用抗凝剂如肝素、EDTA或柠檬酸盐采集血液。 2.在4°C下以700-1000 x g离心血液10分钟。将血浆（上层）转移到干净的试管中，小心不要破坏白色血沉层。将血浆储存在冰上。如果当天未进行分析，则在-80°C下冷冻。血浆样品储存在 -80°C。 3.测定前不需要稀释血浆。 血清 通常，正常人血清的过氧化脂质水平（以MDA表示）为0.23-3.94µM。1,12 1.不使用抗凝剂采集血液。 2.让血液在25°C下凝结30分钟。 3.在4°C下以2000 x g离心血液15分钟。将血清（上层）转移到干净的试管中，小心不要破坏白色血沉层。将血清储存在冰上。如果当天未进行分析，则在-80°C下冷冻。血清样品在-80°C条件下保存一个月。 血清在化验前不需要稀释。 |
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