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植物抗癌药物喜树碱丨喜树碱功能研究

 艾美捷科技 2022-12-29 发布于湖北

喜树碱是一种植物抗癌药物,化学式为C20H16N2O4,浅黄色针状结晶。从中国中南、西南分布的喜树中提取得到。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜树碱成功。喜树碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的疗效,但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱,对肝癌和头颈部癌也有明显疗效 ,而且副作用较少。

喜树碱是从珙桐科落叶植物喜树的种子或根皮中提出的一种生物碱,能直接破坏DNA结构与DNA结合而使DNA易受内切酶的攻击,同时抑制DNA聚合酶而影响DNA的复制,主要对增殖细胞敏感,为细胞周期特异性药物,作用于S期,对G1、G2与M期细胞有轻微的杀伤力。对多种动物肿瘤有抑制作用,与常用抗肿瘤药无交叉耐药性,与甘草酸单胺盐合用,能降低毒性而不降低疗效。外用治疗银屑病的机制是能抑制分裂较快角质形成细胞的有丝分裂,使增生的棘细胞层变薄,角化不全消失,颗粒层恢复形成而达到治疗作用。

喜树碱物化性质:

中文名:喜树碱

外文名:Camptothecin

别    名:(+)-喜树碱

化学式:C20H16N2O4

分子量:348.34

CAS登录号:7689-03-4

EINECS登录号:444-280-6

熔    点:260 °C (dec.)(lit.)

沸    点:757.0±60.0 °C at 760 mmHg

水溶性:极难溶于水

外    观:浅黄色针状结晶

闪    点:411.6±32.9 °C

应    用:抗癌药

喜树碱理化性质:

淡黄色针状结晶。熔点264~ 267℃,[α]D20+31.3°(氯-仿∶甲醇=1∶2)。不溶于水,溶于氯仿、甲醇、乙醇中。其溶液在紫外光灯下显紫蓝色荧光,见光易变质,微有吸湿性,遇浓硫酸显黄绿色,用蒸馏水稀释产生黄绿色荧光,呈碱性。与碘化铋钾反应,生成橙红色复盐沉淀。由喜树根或果粉以有机溶剂提取而得。毒性较大,提取时应小心,有抗肿瘤活性。用以治疗肠癌、直肠癌、胃癌和白血病等症,10-羟基喜树碱毒性较小。

合成方法:

本品是由珙桐科旱莲属植物喜树的根、皮、果实提取制得的生物碱。也可合成生产。将喜树果粗粉用10倍量80%乙醇浸泡24小时,收集渗漉液,减压浓缩回收乙醇。浓缩液静置取清液,用氯仿提取,提取液蒸馏回收氯仿至干,再加甲醇溶液,冷却过滤,滤饼为喜树碱粗品,粗品用甲醇-氯仿混合溶剂重结晶,得喜树碱。对生药喜树果汁,总收率0.03-0.04%.

喜树碱是一种具有抗肿瘤特性的细胞毒性植物生物碱,是一种原型DNA拓扑异构酶I抑制剂。在凋亡检测实验中使用喜树碱创建阳性对照。

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喜树碱(Camptothecin)基本操作:

1、将喜树碱粉末溶解在组织培养级DMSO中,以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。

2、制备50–100µL的DMSO增溶喜树碱等分试样,并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃前再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶,以表明这一点,以便它们在丢弃前只经过一次解冻。

3、喜树碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物,产生6–12µM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液,其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内,培养4小时(37°C)后成功诱导凋亡。

4、对特定细胞系进行时间历程研究,以确定合适的喜树碱浓度和暴露时间,从而为实验实现良好的凋亡诱导水平。

喜树碱(Camptothecin)相关研究:

Recombinant Mouse IL-1 alpha

Recombinant Human IL-8

NIR-FLIVO 690 Free Dye Control Assay

Antibody-Sandwich ELISA Development Kit

ELISA Plate Sealing Covers

Monster Block ELISA Blocking Buffer

FAM-FLICA® Caspase-1 (YVAD) Assay Kit

Pyroptosis/Caspase-1 Assay, Green

FLICA 660 Caspase-1 Assay Kit

FAM FLICA® Caspase-1 (WEHD) Assay Kit

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