喜树碱是一种植物抗癌药物,化学式为C20H16N2O4,浅黄色针状结晶。从中国中南、西南分布的喜树中提取得到。1976年中国化学家高怡生等合成消旋喜树碱成功。喜树碱对肠胃道和头颈部癌等有较好的疗效,但对少数病人有尿血的副作用。10-羟基喜树碱的抗癌活性超过喜树碱,对肝癌和头颈部癌也有明显疗效 ,而且副作用较少。 喜树碱是从珙桐科落叶植物喜树的种子或根皮中提出的一种生物碱,能直接破坏DNA结构与DNA结合而使DNA易受内切酶的攻击,同时抑制DNA聚合酶而影响DNA的复制,主要对增殖细胞敏感,为细胞周期特异性药物,作用于S期,对G1、G2与M期细胞有轻微的杀伤力。对多种动物肿瘤有抑制作用,与常用抗肿瘤药无交叉耐药性,与甘草酸单胺盐合用,能降低毒性而不降低疗效。外用治疗银屑病的机制是能抑制分裂较快角质形成细胞的有丝分裂,使增生的棘细胞层变薄,角化不全消失,颗粒层恢复形成而达到治疗作用。 喜树碱物化性质: 中文名:喜树碱 外文名:Camptothecin 别 名:(+)-喜树碱 化学式:C20H16N2O4 分子量:348.34 CAS登录号:7689-03-4 EINECS登录号:444-280-6 熔 点:260 °C (dec.)(lit.) 沸 点:757.0±60.0 °C at 760 mmHg 水溶性:极难溶于水 外 观:浅黄色针状结晶 闪 点:411.6±32.9 °C 应 用:抗癌药 喜树碱理化性质: 淡黄色针状结晶。熔点264~ 267℃,[α]D20+31.3°(氯-仿∶甲醇=1∶2)。不溶于水,溶于氯仿、甲醇、乙醇中。其溶液在紫外光灯下显紫蓝色荧光,见光易变质,微有吸湿性,遇浓硫酸显黄绿色,用蒸馏水稀释产生黄绿色荧光,呈碱性。与碘化铋钾反应,生成橙红色复盐沉淀。由喜树根或果粉以有机溶剂提取而得。毒性较大,提取时应小心,有抗肿瘤活性。用以治疗肠癌、直肠癌、胃癌和白血病等症,10-羟基喜树碱毒性较小。 合成方法: 本品是由珙桐科旱莲属植物喜树的根、皮、果实提取制得的生物碱。也可合成生产。将喜树果粗粉用10倍量80%乙醇浸泡24小时,收集渗漉液,减压浓缩回收乙醇。浓缩液静置取清液,用氯仿提取,提取液蒸馏回收氯仿至干,再加甲醇溶液,冷却过滤,滤饼为喜树碱粗品,粗品用甲醇-氯仿混合溶剂重结晶,得喜树碱。对生药喜树果汁,总收率0.03-0.04%. 喜树碱是一种具有抗肿瘤特性的细胞毒性植物生物碱,是一种原型DNA拓扑异构酶I抑制剂。在凋亡检测实验中使用喜树碱创建阳性对照。 ![61.png 61.png](http://image109.360doc.com/DownloadImg/2022/12/2915/258282687_1_20221229034844619.png)
喜树碱(Camptothecin)基本操作: 1、将喜树碱粉末溶解在组织培养级DMSO中,以获得2mg/mL喜树碱储备浓度。 2、制备50–100µL的DMSO增溶喜树碱等分试样,并将其冷冻保存在<-20°C。一瓶冷冻的喜树碱可在丢弃前再解冻2次。应标记已解冻1X的小瓶,以表明这一点,以便它们在丢弃前只经过一次解冻。 3、喜树碱浓度范围为2–4µg/mL的刺突细胞培养物,产生6–12µM的细胞培养物喜树碱浓度。该喜树碱浓度范围适用于诱导Jurkat或HL 60细胞悬浮液,其浓度范围通常为1 x 105–1 x 106细胞/mL。在此浓度范围内,培养4小时(37°C)后成功诱导凋亡。 4、对特定细胞系进行时间历程研究,以确定合适的喜树碱浓度和暴露时间,从而为实验实现良好的凋亡诱导水平。 喜树碱(Camptothecin)相关研究: Recombinant Mouse IL-1 alpha Recombinant Human IL-8 NIR-FLIVO 690 Free Dye Control Assay Antibody-Sandwich ELISA Development Kit ELISA Plate Sealing Covers Monster Block ELISA Blocking Buffer FAM-FLICA® Caspase-1 (YVAD) Assay Kit Pyroptosis/Caspase-1 Assay, Green FLICA 660 Caspase-1 Assay Kit FAM FLICA® Caspase-1 (WEHD) Assay Kit
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