【中药多糖】复旦大学（IF=14.903）：鱼腥草多糖对“二次打击”大鼠急性肺损伤和内毒素发热的保护...

文章信息

发表时间：2018年3月

影响因子：IF=14.903

期刊：Acta Pharmaceutica Sinica B

中科院分区：一区

题目：Beneficial effects of Houttuynia cordata polysaccharides on'two-hit' acute lung injury and endotoxic fever in rats associated with anti-complementary activities

【作者及发表单位】：本期推荐的是由复旦大学研究团队合作发布于Acta Pharmaceutica Sinica B(IF:14.903)的一篇文章，鱼腥草多糖对“二次打击”大鼠急性肺损伤和内毒素发热的保护作用及其抗补体作用。

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研究背景

鱼腥草是一种用于清热解毒的传统草药，也被用于治疗严重急性呼吸综合征(SARS)。在体外，鱼腥草粗多糖(CHCP)通过作用于补体系统的C3和C4组分而不干扰凝血系统，通过经典途径和替代途径显示出强大的抗补体活性。本研究旨在探讨CHCP对失血性休克加脂多糖(LPS)二次打击致大鼠急性肺损伤(ALI)和内毒素诱导发热的预防作用。CHCP通过减少肺水肿和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的蛋白渗出，显著减轻“二次打击”ALI模型的肺损伤。此外，它还减少补体激活产物在肺内的沉积，改善氧化-抗氧化失衡。此外，CHCP还能抑制大鼠发热，降低白细胞数，恢复血清补体水平。CHCP对补体系统异常激活的抑制作用可能是其治疗炎症性疾病的重要机制之一。抗互补多糖可能是鱼腥草清热功能的关键物质之一。

02

研究结果

2.1 CHCP的性质及其体外抗补体活性

CHCP为深褐色粉末，易溶于水。CHCP的总碳水化合物、糖醛酸和蛋白质含量分别为77.2172.84%、36.6974.94%和6.1771.93%。HPGPC分析表明，CHCP含有一种主要的多糖和几种次要的多糖，分子量在1000-5000 kDa之间。GC分析表明，这些复杂的大分子是由多个单糖连接的，主要是葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和鼠李糖，其比例为3.40：2.14：1.17：1，同时还有少量的甘露糖和木糖。CHCP对经典途径的抑制作用强于肝素(P<0.001)，而对替代途径的抑制作用弱于肝素(P<0.01)(图1)。其CH50值和AP50值分别为0.09270.020 mg/m L和0.20970.036 mg/m L(n=3)。研究结果表明，CHCP主要阻断C3和C4，并可能与C5相互作用。5.5 mg/L的肝素可显著延长再钙化时间和凝血酶时间，与赋形剂对照组比较，差异有统计学意义。

图1 CHCP对补体系统经典途径(A)和替代途径(B)的抑制作用

图2 利用耗尽C的血清对单个成分进行溶血分析

2.2 CHCP对“两次打击”急性肺损伤（ALI）的作用

肺组织HE染色显示假手术组肺组织结构清晰，细胞渗入少，而ALI组大鼠肺组织损伤严重，包括明显的间质水肿、间隔增厚、出血和炎性细胞浸润(图3A)。强的松能有效地抑制肺损伤。CHCP(50和100 mg/kg)处理显著减少ALI大鼠肺中补体激活产物的沉积(图3B)。

图3 CHCP对200×大鼠肺组织病理改变的影响

ALI模型组肺湿/干比值明显高于假手术组。与ALI大鼠相比，CHCP 100 mg/kg组、50 mg/kg组肺W/D比值显著降低(P<0.01和P<0.05)，强的松组肺W/D比值显著降低。CHCP可明显改善ALI时肺泡-毛细血管屏障的损伤。CHCP(50mg/kg，100 mg/kg)和泼尼松(50 mg/kg，100 mg/kg)和强的松均能明显抑制BALF中白细胞的聚集和肺组织中性粒细胞的减少，但对淋巴细胞的减少均有较好的抑制作用。

图4 BALF分析

如图4所示，CHCP 50 mg/kg和100 mg/kg剂量显著减轻了2 h(P<0.05)和P<0.01(P<0.01)和4 h(P<0.01)时血清补体活性的下降，表明CHCP减少了补体成分的消耗(图5)。

图5 CHCP对ALI大鼠补体活性的影响

2.3 CHCP对脂多糖性发热的影响

实验期间，假手术组大鼠体温维持在正常范围，变化不大。除60~90min为正常时段外，模型组大鼠在30min和2~6h的体温和TRI均显著高于假手术组(P<0.01或0.001)。如图3A所示，CHCP50、100、200 mg/kg剂量组在30min~6h均能显著抑制内毒素引起的小鼠发热(P<0.05、0.01或0.001)。

图6 CHCP对内毒素致热大鼠的影响

如图6C所示，与假手术组相比，模型组大鼠的补体水平显著降低(P<0.001)。CHCP(100 mg/kg和200 mg/kg)治疗可部分恢复小鼠血清补体水平(P<0.05)，但CHCP(50 mg/kg)低剂量组和阿司匹林组对补体水平无明显影响。CHCP各剂量组(50mg/kg，Po0.01；100,200 mg/kg，Po0.001)和阿司匹林组(Po0.001)均能显著抑制脂多糖诱导的小鼠外周血中白细胞的升高。

03

结论

综上所述，本研究证明CHCP不仅能改善大鼠的“二次打击”ALI，而且还能改善内毒素诱导的发热，这两者都与抑制过度激活的补体系统有关。结果表明，反互补多糖在黄连的清热作用中起着重要作用。此外，CHCP对凝血系统无干扰。CHCP可能是一种很有前途的天然补体抑制剂，用于补体相关疾病的治疗。