高中生物发酵工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．果胶酶可从黑曲霉中提
取，下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是（ ）A．蛋白胨和酵母提取物培养基B．尿素固体培养基C．MS培养基D．添加蔗糖的豆芽汁培
养基2．下列关于培养基配制的叙述，错误的是（?）A．合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的B．固体培养基中加入的琼脂能提供额
外的碳源和氮源C．对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做调整D．无论是固体培养基还是液体培养基，配置时都要加水3．如图是探究果酒
与果醋发酵的装置示意图，下列有关叙述错误的是（ ）A．进行果酒发酵时，需密封气体入口B．进行果酒发酵时，培养基装量需预留约
1/3 空间C．进行果醋发酵时，最好在气体入口处塞脱脂棉球D．进行果醋发酵时，加入的酒-水混合物需调 pH 至 8.04．常用于培
养酵母菌的培养基是（?）A．肉汤培养基B．查氏培养基C．LB培养基D．麦芽汁琼脂培养基5．唐代苏敬的《新修本草》云：凡作酒醴须曲，
而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲。下列叙述错误的是（ ）A．装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定B．“蒲桃、蜜等酒
独不用曲”说明葡萄酒的酿制不需要微生物C．酿酒中期起泡现象是微生物无氧呼吸产生的CO2释放形成的D．工业发酵中为降低杂菌污染，发酵
前需要对器具、原料等进行灭菌6．下列关于发酵技术的应用，有关叙述合理的是 （?）A．将葡萄汁煮沸冷却后灌入发酵瓶，密闭发酵即可自制
葡萄酒B．家庭制作果醋时，在液体的表面能形成单菌落C．从传统作坊中分离和筛选优良菌种可用于大规模工厂化生产泡菜D．制作酸奶过程中，
先通气培养，后密封发酵7．下图表示探究高效耐低温原油降解菌YF28－1(8)降解原油的最适温度实验的结果，5组实验中的温度t1～t
5逐渐递增。下列相关叙述正确的是（ ）A．对本实验中使用的接种工具——接种环采用灼烧灭菌法灭菌B．实验中应注意控制温度、接种的菌
液量等无关变量C．温度为t1的培养皿为对照组，其他4组均为实验组D．若要确定更精确的最适温度，应在t2～t4内设置更小的温度梯度8
．如图为腐乳制作过程的流程图，下列说法错误的是（ ）―→―→―→A．用胶条密封瓶口时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染
B．毛霉为需氧型真菌，为避免其无氧呼吸，放置豆腐时要留出一定缝隙C．加卤汤、密封腌制过程中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白
质D．加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分使之变硬，同时能抑制微生物的生长9．将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式
处理，并放置在不同的温度环境中，培养24小时后，观察所得结果列表如下：根据上述实验结果所作出的下列判断中，错误的是（ ）A．
编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B．根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C．将编号e和a
的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长D．若揭开编号f的盖子，24小时后可观察到培养基表面会出现浑浊10．有关平板划线操作正
确的是A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种
的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养二、综合题11．发酵工程填空(1)分离微生物的方法
_______，_______；统计样品中活菌数目的方法_______。(2)填表代谢类型反应原理酒精发酵-酵母菌①____③__
__乳酸发酵-乳酸菌异养厌氧型C6H12O62C3H6O3(乳酸)+能量醋酸发酵-醋酸菌②____④____⑤____三、实验题1
2．胡萝卜素主要存在于深绿色或红黄色的蔬菜和水果中，可用作营养强化剂和食品着色剂。下图是对获得的胡萝卜素粗品进行鉴定的结果示意图。
请回答下列问题：(1)胡萝卜素在人的肝脏中能氧化成维生素____ 。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是萃取法，加热时应该注意控制___
_。除了从植物中提取天然胡萝卜素外，还可以从养殖的岩藻中获得或者利用____进行生产。(2)萃取时的有机溶剂应该具有很高的____
，能够充分____胡萝卜素，并且不与水混溶。(3)萃取液浓缩之前需进行过滤的目的是____。(4)对提取的胡萝卜素粗品可采用___
_法进行鉴定。上图的A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是____。四、填空题13．棉花是自然界中纤维素含量_______的天
然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。许多商品纤维素都是由天然纤维素制得的，如水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、不溶于
水的微晶纤维素等。14．为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验：KH2PO4Na2HPO4MgSO4?7H2O
葡萄糖尿素琼脂H2O1．4g2．1g0．2g10．0g1．0g15．0g1000mL若在上述培养基中加入酚红指示剂，该培养基能对培
养的细菌起到_____的作用。若取土样4g，应加入_____ml的无菌水，因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将104﹣107
倍的稀释液分别吸取0．2mL加人到固体培养基上，在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：219、212、25
6，则每克该土壤样品中的菌株数为_____。15．根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。（1）胡萝卜
素是________色的结晶，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥
、________、________、浓缩。（2）在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中，应严格将________和________控制在一
定范围内，原因是_______________________。（3）提取的胡萝卜素可通过________法进行鉴定，在鉴定过程中
需要用________对照。参考答案1．D【分析】黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可
，如麦芽汁加琼脂，将发酵啤酒的原料（未加酒花），稀释加琼脂15克，溶化后分装，121℃灭菌30分钟。蔗糖豆芽汁培养基可以用来培养酵
母菌和霉菌，使它们与细菌分离开来。【详解】根据以上分析可知，黑曲霉属于真菌中的霉菌类微生物，霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的
豆芽汁即可。综上所述，D正确，A、B、C错误。故选D。2．B【分析】1、不同培养基的用途不同，如固体培养基可用于微生物的分离和计数
，液体培养基可用于微生物的繁殖。2、琼脂的化学本质为多糖，但不能被微生物分解利用，是一种凝固剂。3、不同微生物的培养条件不同，如培
养乳酸杆菌时需要在培养基中加入维生素，培养霉菌时需将pH调至酸性。4、培养基中都含有碳源、氮源、无机盐和水。【详解】A、不同培养基
的用途不同，如在固体培养基上可形成单个菌落从而实现微生物的分离，鉴别培养基可以鉴定微生物的种类，A正确；B、固体培养基中加入的琼脂
不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，B错误；C、对有特殊生长条件需求的微生物要对培养基做调整，如培养乳酸杆菌时需
要在培养基中加入维生素，C正确；D、培养基中都含有碳源、氮源、无机盐和水，无论是固体培养基还是液体培养基，配置时都要加水，D正确。
故选B。3．D【分析】图示是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，其中培养基入口能补充营养物质；气体入口能通入气体；气体出
口能排出气体。【详解】A、果酒发酵时要封闭气体入口，使酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，A正确；B、进行果酒发酵时，培养基装量需预留约1
/3空间，一是为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，二是防止酵母菌发酵时产生CO2导致汁液溢出，B正确； C、进行果醋发酵时在气体入口处
塞脱脂棉球过滤空气，防止杂菌污染，C正确；D、果醋发酵时，加入的酒-水混合物需调pH至7. 0，D错误。故选D。【点睛】果酒发酵的
原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精和CO2。4．D【分析】微生物生长繁殖需要一定的培养基，培养基的成分包括水、碳源、氮源、无机盐等，培
养基的配制应根据微生物对营养物质的需求选择合适的配方和比例。【详解】A、肉汤培养基常用来培养细菌，A错误；B、查氏培养基用于培养能
以硝酸盐作为唯一氮源的真菌和细菌，及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别，B错误；C、LB培养基常用来用于培养基因工程受体菌（大肠
杆菌）的培养，C错误；D、麦芽汁琼脂培养基常用于培养酵母菌，D正确。故选D。5．B【分析】果酒制作利用了酵母菌的无氧呼吸，在无氧条
件下，酵母菌可以把葡萄糖分解为酒精和二氧化碳。【详解】A、装置密闭发酵过程中，酵母菌的无氧呼吸使酒精度先增加，当葡萄糖消耗到一定程
度时无氧呼吸停止，酒精度趋于稳定，A正确；B、果酒制作利用了果皮表面附着的酵母菌，不需要额外添加微生物，B错误；C、酿酒中期起泡现
象是酵母菌无氧呼吸产生的CO2释放形成的，C正确；D、工业发酵中发酵前需要对器具、原料等进行灭菌，以降低杂菌污染，D正确。故选B。
6．C【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是
异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为
醋酸。3、泡菜制作利用了乳酸菌的无氧呼吸，乳酸菌是严格的厌氧菌，泡菜制作不需要通气发酵。4、制作酸奶的乳酸菌属于厌氧菌，只能在无氧
条件下繁殖。【详解】A、将葡萄汁煮沸冷却后灌入约2/3 瓶，通入无菌空气，使酵母菌大量繁殖，然后密闭发酵，可自制葡萄酒，A错误；B
、在固体培养基的表面才能形成菌落，因此制作果醋时，在液体的表面不会形成单菌落，B错误；C、从传统作坊中分离和筛选优良乳酸菌菌种纯度
更高，发酵效果更好，可用于大规模工厂化生产泡菜，C正确；D、乳酸菌是一种严格的厌氧菌，有氧气存在时，其发酵会受到抑制，因此利用乳酸
菌制作酸奶的过程中，应一直处于密闭状态，否则会导致发酵失败，D错误。故选C。【点睛】7．D【分析】分析题文和图形：本实验的自变量为
不同温度，因变量为菌落的数目。【详解】A、图中平板上的菌落均匀分布，说明使用的接种方法是稀释涂布平板法，使用的接种工具是涂布器而非
接种环，A错误；B、该实验探究原油降解菌降解原油的最适温度，因此温度在本实验中为自变量，接种的菌液量为无关变量，B错误；C、实验中
五组的温度都不同，该五组均为实验组，不同实验组之间相互对照，C错误；D、图中t3培养皿中的菌落最多，即最接近最适温度，因此若要确定
更准确的最适温度，应该在t2～t4组所对应的温度范围内设置更小的温度梯度，D正确。故选D。8．C【分析】1、传统的腐乳制作过程中，
豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的
污染，保证产品的质量。2、腐乳制作过程中，加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。3
、卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，酒的含量一般控制在12%左右，若酒的含量过高会延长腐乳成熟的时间，若酒的含量过低，则不能抑制杂
菌污染。4、装瓶时，操作要迅速小心。加入卤汤后要用胶条将瓶口密封，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。【详解】A、加
入卤汤后要用胶条将瓶口密封，封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染，A正确；B、参与腐乳制作的微生物有多种，其中起主要作
用的是毛霉，而毛霉为好氧型真菌，所以为避免其无氧呼吸，放置豆腐时要留出一定缝隙，B正确；C、加卤汤、密封腌制，可防腐杀菌，同时使腐
乳具有一定的风味，在此条件下毛霉不能生长、增殖，C错误；D、加盐腌制的目的：析出豆腐中的水分使之变硬；调制腐乳的风味，确保腐乳具有
一定的咸度；抑制微生物的生长，D正确。故选C。【点睛】本题考查腐乳的制作，要求识记参与腐乳制作的微生物及其代谢类型，掌握腐乳制作的
原理及条件，能结合所学的知识准确判断各选项。9．B【详解】试题分析：根据对照原则，a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌，比较可知，有
大肠杆菌培养基的表面会变浑浊，无大肠杆菌培养基的表面清晰；A正确。含有抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上，可根据培养基表面的浑浊
程度判定此种抗生素对大肠杆菌的杀菌能力，即X强于Y；B错误。e、a形成对照，其变量是温度，可知0 ℃不适合大肠杆菌生长；C正确。f
暴露在空气中后，会自然接种菌种，形成菌落，使培养基表面出现浑浊；D正确。考点：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生运用所学知
识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。10．D【详解】接种环在使用过
程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其它微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误。打开含菌种的试管需要通过
火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌再塞上棉塞，B错误。将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空
气中杂菌混入，C错误。最后将平板倒置，防止盖子水滴落引起污染，有利培养基水蒸发，D正确。11．(1)???? 平板划线法????
稀释涂布平板法???? 稀释涂布平板法(2)???? 异养兼性厌氧型???? 异养好氧型???? C6H12O62C2H5OH(酒
精)+2CO2+能量???? C6H12O6+O22CH3COOH(乙酸)+2H2O+2CO2+能量???? C2H5OH+O2C
H3COOH(乙酸)+H2O+能量【分析】微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线
，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：
将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。（1）分离微生物的方法有平板划线法（在线的开始部分，微
生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落）和稀释涂布平板法（待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培
养皿表面，经培养后可形成单个菌落）；统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。（2）酒精发酵-酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，即
在有氧时可以进行有氧呼吸，在无氧时可以进行无氧呼吸；反应原理是C6H12O6 2C2H5OH(酒精)+2CO2+能量；醋酸发酵菌种
是醋酸菌，代谢类型是异养好氧型；反应原理是C6H12O6+O2 2CH3COOH(乙酸)+2H2O+2CO2+能量；C2H5OH+
O2 CH3COOH(乙酸)+H2O+能量。12．(1)???? A???? 温度和时间???? 微生物的发酵(2)???? 沸点
???? 溶解(3)滤去不溶物(4)???? 纸层析???? AD【分析】胡萝卜素化学性质稳定，不溶于水，易溶于石油醚等有机溶剂，
可以用萃取法提取。萃取时的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析进行鉴定
。（1）一分子的β-胡萝卜素在人的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A。萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原
料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。工业生产上，提取胡萝卜素主要是三种方法：一是从植物中提取；二是从大面
积养殖的岩藻中获得；三是利用微生物的发酵生产。（2）萃取剂的沸点高，加热萃取时不易挥发，且能充分溶解胡萝卜素，才能充分提取。（3）
萃取液中含有胡萝卜颗粒的剩余物，需要过滤，否则浓缩后这些残渣和胡萝卜素混在一起。（4）提取的胡萝卜素粗品可通过纸层析进行鉴定，图中
B、C点点样的是萃取样品，A、D点点样的是标准样品，进行对照。13．最高【解析】略14．???? 选择和鉴别???? 36????
1．15×109【详解】该培养基中含有尿素，起到选择作用，又含有酚红，起到鉴别作用，因此是选择鉴别培养基；若取土样4g，应加入3
6mL无菌水，稀释10倍；在对位稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为：219、212、256，则每克该土壤样品中
的菌株数为= （219+212+256)÷3×106÷0.2=1.15×109。15．???? 橘黄色???? 萃取法???? 萃
取???? 过滤???? 温度???? 时间???? 温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解???? 纸层析法???? 胡萝卜素
的标准样品【解析】1、植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取等。（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性。把含有芳香油的花、叶等放入水中
加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提
取方法叫蒸馏法。根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏。有的原料不适用水蒸气蒸馏法，
因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分被水解等问题。（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机
溶剂中，使芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油。（3）压榨法：在橘子、柠檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量较多
，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法。植物芳香油的蒸馏提取过程：浸泡、加热蒸馏、乳浊液的分离。2、胡萝卜素、叶绿素、叶黄
素、番茄红素和辣椒红素都是脂溶性植物色素，一般不溶于水，易溶于酒精、乙醚和氯仿等有机溶剂。故常用有机溶剂萃取胡萝卜素。提取过程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→鉴定。【详解】（1）胡萝卜素是橘黄色的结晶，属于脂溶性物质，其化学性质比较稳定，沸点高且不溶于水，常用石油醚作为溶剂，因此可用萃取法提取胡萝卜素。也就是让胡萝卜素溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后，获得胡萝卜素。操作的一般流程是：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。（2）胡萝卜素萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响，因温度过高和时间过长都会导致胡萝卜素分解，在加热干燥过程中，应该控制好温度和时间，因为温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解。（3）提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定，在鉴定过程中需要用标准样品对照，以便确定提取的胡萝卜素的纯度。【点睛】熟知植物有效成分提取的方法和原理以及适用的对象是解答本题的关键，掌握胡萝卜素的提取方法和流程以及操作要点是解答本题的另一关键。试卷第11页，共33页试卷第11页，共33页答案第11页，共22页答案第11页，共22页 |
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