一、GeneXpert全自动荧光定量PCR系统介绍Xpert MTB/RIF以实时荧光PCR为原理，检测结核分枝杆菌复合群特有的利福平耐药基因（rpoB基因），能快速报告患者样本中是否有结核分枝杆菌及其是否利福平耐药。 该系统完全整合了基于定量PCR的分子遗传检测所需的三个步骤（样品准备，扩增，检测）并将其自动化，只需将样品加入系统专用反应盒中，系统就会自动按照“核酸提取→扩增→检测”方式运行。所有的稀释及提取步骤均在试剂盒的不同通道中完成，最大程度地减少了污染的发生。 GeneXpert系统在准备样品及核酸的提取环节完全实现自动化。DNA提取所需的复杂步骤都在其microfluidic微流样品池里完成。GeneXpert反应盒可以容纳各种容积的样品，并将初始样品浓缩。样品的浓缩和纯化增加了测试结果的敏感度。样品核酸被提取后，进入反应管并在其中扩增至被检测。 GeneXpert系统在扩增过程中使用的模块具有高精度定量PCR所需的快速升温降温循环功能，同时还可以实时监测每个上样孔内的化学反应，以便快速复制出足够的样品核酸拷贝数并在第一时间将其检测出来。GeneXpert系统中每个模块都是独立工作的，因而可以同时进行不同的检测。 GeneXpert系统对目标核酸序列的检测具有高度的光学敏感性，实时的光学监测使得软件可以一经发现目标序列就给出结果，极大缩短了得到检测结果所需的时间。 GeneXpert全自动荧光定量PCR系统可以满足临床对于结核的诊断快速、准确的要求，并能获得耐药结果，及时干预，可以达到“检测即治疗”、防止耐药性结核传播的目的。 二、GeneXpert定量PCR的检测意义GeneXpert在结核病诊断中具有高敏感度和高特异度，其敏感性及特异性均大于抗酸杆菌染色，与结核杆菌培养及药敏试验结合使用能大大提高结核杆菌检出率，如果检查结果显示阳性提示发现了结核杆菌的存在，可能是结核感染引起，还能够评估是否存在耐药结核的现象，但是也需要结合具体综合性的评估。 GeneXpert是一种基因扩增技术，主要排查标本当中是否存在结核杆菌，同时还可检测基因序列当中是否有利福平或者异烟肼耐药基因的存在，比如在临床当中如果痰液、肺泡灌洗液等标本出现了GeneXpert阳性的结果，通常能够说明是肺结核引起，而且对于指导抗结核治疗可能也会有一定的价值，所以GeneXpert检查对于肺结核等结核病的诊断是有一定临床意义。但是GeneXpert的临床意义需要结合具体情况进行评估，比如确诊为肺结核的患者抗结核治疗以后做痰或者灌洗液GeneXpert的检查出现了阳性的结果，并不能证明治疗没有效果；而且也不能代表一定就会有传染性，因为体内残存的已经被杀灭的结核杆菌做该项检查的时候，同样可以出现阳性，所以需要依据具体病情综合性地进行评估。 |
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