脱钙骨组织硝酸银浸染法 取新鲜骨组织固定于10%甲醛,脱钙,充分水洗; 改良Plank液:氯化铝8克,盐酸10毫升,甲酸6.5毫升,蒸馏水100毫升 室温20~25℃脱钙2~3天;温度28~30℃,脱钙36~48小时;超过35℃,对组织损伤大甚至溶化。 EDTA液:EDTA酸性盐5.62克溶于蒸馏水100毫升,混合加温煮沸,溶液呈浑浊悬浮液。再加14%氢氧化钠17.5毫升即完全溶解,溶液呈透明状,其pH为7.4,25℃脱钙2周左右。 入氨银液25℃浸染30~40小时或72小时,蒸馏水洗(2~4小时); 氨银液:10%硝酸银水溶液5毫升,滴加氨水产生沉淀溶解,加蒸馏水至50毫升 冰冻切片10~30微米,脱水,透明,封片。 结果:骨小管、骨陷窝呈褐黑色,哈佛氏骨板棕褐色。 骨切片厚度以20微米为宜。 |
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