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面对众多的货号,到底该如何选择抗体呢?

 外科黄文斌 2023-04-25 发布于广东
今日问题:
搜靶点发现好多抗体,不知道选哪个?
单抗好还是多抗好?
适合我的实验种属的是哪支?

这是大家常电话咨询的问题之一,小编仔细总结了一下,以帮助大家正确、快速地选择适合自己的抗体。

单抗和多抗各自优势

1. 在相同条件下,使用多抗更容易提高检测的灵敏度,对于表达偏低的蛋白也更容易检测出。

2. 单克隆抗体则在特异性,批次间稳定性方面都会优于多克隆抗体。CST的单克隆抗体主要为兔源和鼠源两大类。由于CST在单克隆抗体的细胞克隆筛选和多种应用的验证等方面非常严格,保证了CST单克隆抗体保持着业界的领先水平。

如何查找有没有想要的抗体?

简言之就是一看应用,二看种属,如有XP®抗体的情况下,首选XP®级别的抗体。

以中文网站为例www.

案例:比如想购买Akt和P-Akt(ser473) 位点,做WB和IHC-P,种属是rat。

1.首先在search的方框里输入akt (不区分大小写),点击搜索🔍,会出来一系列产品:

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2.然后,请在左边栏点击Category(种类)中的Primary Antibodies以筛选出一抗,同样的,也在左边栏,选择Application(实验种类)Species Reactivity(实验种属)做进一步的筛选。So easy😊~

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比如想做免疫组化的石蜡切片,那么要在Application这栏勾选IHC-paraffin;种属反应性是大鼠,那么需要在Species Reactivity这栏勾选rat。

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3.层层筛选之后就只有几个抗体了。那么咋看呢?

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其中Akt(pan)表示该靶点的总蛋白,如4691,4685,2920和75692,在几个抗体都满足要求的时候,请不要纠结:没有特别要求靶向免疫原序列的情况下,一般任选一个就可以了,CST抗体均保证抗体特异性、灵敏度和批次间一致性。

选完总蛋白抗体之后,再选磷酸化的抗体,这里仅有两个货号:9611和4060。其中9611是个motif抗体,用来检测在某位置上有赖氨酸/精氨酸的磷酸化丝氨酸/苏氨酸的内源性蛋白质。这时剩下的只有4060,可以看到4060抗体名称中有XP®*样,是我们的明星产品。

而PRAS40则是蛋白激酶B(PKB/Akt)的作用底物,做该靶点,这些相关知识要清楚的。

抗体的规格:CST抗体一般有3种规格:分别是20 µl ( 2 western blots )、100 µl ( 10western blots ) 和300 µl ( 30 western blots )。

其中,10 western blots代表该抗体可以做 10 次标准 western blots 膜(10 cm x 10cm)的孵育,即大约可做100个样本。具体计算如下:该抗体用于 WB 的稀释比例为 1:1000,我们一张膜用 10 ml 一抗工作液孵育,那么,需用 10ml 的 TBST, 按照说明书上建议的 5%BSA 或者 5% non-fat milk, 加入 10ul 的抗体配置成一抗工作液。因此,100ul 一抗原液可用于 10 次western blots。对于不同尺寸的膜,请相应调整抗体工作液体积。

同样道理,也可以进入我们的英文网站https://www.


用上述方法来进行选择,比如这次想选P-Akt (Thr308) 位点,那么只需在search的方框里输入 akt 308,点击search,然后根据我们的口诀:“一看应用,二看种属,如有XP®抗体的情况下,首选XP®级别的抗体”来选择哦!

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*XP®字样:CST标有XP®标志的,是CST特有的专利技术生产制作的系列产品,CST所有产品都经过多种实验交叉验证,保证产品的特异性、灵敏度和批次间一致性,XP®eXceptional Performance)级别的单克隆抗体,这些抗体无论在效价、应用类型和种属、特异性等方面的表现都更加卓越,也是我们重点推荐的明星产品。

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