【原】Cells：靶向TRPA1通道治疗多发性硬化症神经性疼痛

脑声常谈 2023-06-02 发布于上海

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多发性硬化症神经性疼痛研究，图片来源网络

2023年5月30日圣玛丽亚联邦大学Gabriela Trevisan团队在Cells发表 “Neuropathic-like Nociception and Spinal Cord Neuroinflammation Are Dependent on the TRPA1 Channel in Multiple Sclerosis Models in Mice”，揭示了多发性硬化症小鼠神经病变样伤害感觉和脊髓神经炎症依赖于TRPA1通道。

瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)的激活与神经性疼痛样症状有关。然而，TRPA1是否仅参与疼痛信号传导或参与多发性硬化症(MS)的神经炎症尚不清楚。在该研究中作者使用两种不同的模型来评估TRPA1在神经炎症中疼痛样症状的作用。使用髓鞘抗原，TRPA1 +/+或TRPA1-/-雌性小鼠发生复发-缓解性实验性自身免疫性脑脊髓炎(RR-EAE)或进行性实验性自身免疫性脑脊髓炎(PMS)-EAE。评估运动表现、临床评分、机械/冷异常性痛和神经炎性MS标志物。在RR-EAE或PMS-EAE Trpa1+/+小鼠中检测到机械和冷异常性疼痛，在Trpa1-/-小鼠中未观察到。在RR-EAE或PMS-EAE Trpa1+/+小鼠中观察到的脊髓中的两种神经炎症标志物，电离钙结合受体分子1 (Iba1)或胶质纤维酸性蛋白(GFAP)标记的细胞数量增加，在Trpa1-/-小鼠中减少。通过Olig2标记和LFB髓鞘染色，还检测了Trpa1-/-诱导小鼠脱髓鞘过程的预防作用。研究结果表明，TRPA1在EAE小鼠模型中的镇痛作用主要是通过其促进脊髓神经炎症并进一步加强通道抑制来治疗MS神经性疼痛。

图一 TRPA1基因缺失在RR-EAE小鼠模型中阻止机械性和冷性异常性痛发生

从第21天到第35天，Trpa1+/+小鼠的机械和冷异常性疼痛出现了时间依赖性的增加。与Trpa1+/+小鼠相比，Trpa1基因缺失的小鼠在RR-EAE诱导后没有发生机械或冷异常性疼痛。因此，TRPA1缺失可阻止神经性疼痛样症状的发展。在试验期间，各组小鼠体重均无显著差异。此外，所有试验组在转棒测试中均未出现运动活动发生明显的变化。

图二 TRPA1基因缺失可阻止PMS-EAE诱导后机械性和冷性异常痛的发生

在PMS-EAE模型中，诱导的Trpa1+/+小鼠表现出机械性和冷性异常性疼痛的发展，而PMS-EAE Trpa1-/-小鼠则没有出现这种情况。此外，两种模型鼠的体重在PMS-EAE组和对照组之间没有显著差异，且所有的试验动物在转棒测试中均未出现明显的运动能力变化。

图三 Trpa1-/-诱导的RR-或PMS-EAE模型小鼠脊髓中Iba1标记物减少

研究人员还在两种MS小鼠模型中研究了脊髓中激活小胶质细胞的标志物Iba1的表达。RR-和PMS-EAE诱导的Trpa1+/+小鼠中Iba1+ve细胞增加。在两种EAE小鼠模型中，在脊髓总面积和背角区域均观察到Iba1+细胞数量的增加。在脊髓中脊髓背角观察到来自RR-或PMS-EAE Trpa1-/-的脊髓切片中Iba1+ve细胞数量明显减少。

图四 RR-或PMS-EAE模型小鼠Trpa1-/-脊髓GFAP标记物减少

作者接下来研究了两种MS模型中星形胶质细胞的激活情况。结果表明RR-EAE诱导后，Trpa1+/+小鼠的GFAP+ve细胞增加，而Trpa1-/-小鼠的GFAP+ve细胞明显减少，脊髓总面积和背角面积也明显减少。在PMS-EAE小鼠中也观察到类似的结果。Trpa1+/+诱导小鼠脊髓总面积和脊髓背角GFAP+ve细胞数量增加，Trpa1-/-PMS-EAE诱导小鼠GFAP+ve细胞数量减少。

图五在RR-和PMS-EAE Trpa1-/-小鼠中脱髓鞘过程减少

TRPA1缺失是否能够减少RR-和PMS-EAE模型中临床症状和脱髓鞘的发展。在研究中作者发现Trpa1+/+或Trpa1-/-的RR-或PMS-EAE的临床体征发展是相同的，表明Trpa1缺失没有表现出预防作用。然而，LFB髓鞘染色显示Trpa1+/+ RR-和PMS-EAE小鼠脊髓髓磷脂减少，而Trpa1-/-RR-和PMS-EAE小鼠脊髓中未观察到这种情况。

图六 trpa1缺失小鼠在RR-或PMS-EAE诱导后表现脱髓鞘过程的预防

在Trpa1+/+ RR-和PMS-EAE诱导的小鼠中，少突胶质细胞增殖标志物Olig2的减少也观察到脱髓鞘过程。TRPA1缺失减少了通过降低诱导小鼠脊髓总面积和背角的Olig2+ve细胞数量观察到的脱髓鞘过程。进行性实验性自身免疫性脑脊髓炎诱导小鼠脊髓总面积和脊髓背角的Olig2+ve细胞数量也有类似的预防作用。