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激光扫描共聚焦显微镜

 星晨炼 2023-06-22 发布于浙江


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这种显微镜的优势就体现在三个词上:
【激光】【扫描】和【共聚焦】。

【激光】
指的是【照明光源】用的是【激光】。

【激光的特点】是
其中的光子【高度一致】,
【波长较短】【光束很细】,
所以
【共聚焦显微镜】
有【较高的分辨率】,
大约是【普通光学显微镜】的 三倍。

【扫描】
指的是【成像方式】是通过【点扫描方式】来成像的。

【共聚焦】
指的是在【传统光学显微镜】的基础上,
采用【共轭聚焦的原理和装置】
使得只有在【物镜的焦平面上】发出的【荧光】才能够到达【检测器】。

较【普通光学显微镜】和【荧光显微镜】,
【共聚焦显微镜】的【设备】和【部件】明显增多。
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【原理】
【共聚焦显微镜】采用的是【激光束】作为【光源】,
【激光束】经过【照明针孔】
经由【分光镜反射】
通过【物镜】
聚焦于【样品】上
也形成了一个【较细的光柱】。

此时【光柱内激发出的荧光】
可以通过【原来的入射光路】反向通过【分光镜】,
被【光电被灯管】探测收集,在【显示器上】显示图像。

这里注意,
此时跟【普通的荧光显微镜一样】,
【焦平面】上面和下面的区域的【荧光】依然能够被激发,
并向上传导至【检测器】。

而【共聚焦显微镜】多了一个【探测针孔】的设置,
这样就能阻挡【焦平面以外发出的荧光】,
只通过【焦平面】那一点发出的【荧光】。

因此,
【共聚焦显微镜】非观察点的背景呈现【黑色】,
对比度增加,成像更加清晰。

不仅如此,
【共聚焦显微镜】还配备一定的【扫描单元】一点点地扫描,
这样就可【逐点逐行】快速扫描成像,
并且通过调节【不同的焦平面】
就可以扫描【不同深入层次】的图像,
然后经过计算机的分析和重构,即可以获得【高清晰的、三维立体的图像】。

因此,
【共聚焦显微镜】
可以用于【立体结构的分析】。

跟【普通荧光显微镜】相比,
【共聚焦显微镜】优势明显,

除了【普通荧光显微镜的用处】之外,
【共聚焦显微镜】常用于对样品的【立体结构的分析】,
能【十分灵活、直观地进行形态学观察】
并揭示【亚细胞结构的空间关系】,
可以用于【组织和细胞中的定量的荧光测定】
【荧光漂白恢复技术】
【长时程细胞迁移和生长的观察】
【细胞内钙离子和 pH 值动态的分析】
以及【细胞间通讯的研究】等。

【共聚焦显微镜】在【神经科学领域】应用非常广泛,
是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。

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