胎牛血清

和元李记 2023-08-29 发布于上海

展开全文

一、概念

胎牛血清是一种广泛应用于细胞培养中的添加剂，它时维持细胞生长和代谢稳态方面的关键者。在细胞培养过程中，细胞需要在富含营养物质、生长因子、激素和其他成分的培养基下来生长和繁殖。

二、来源

胎牛血清是通过母牛刨腹产胎牛心脏密闭穿刺采血获得的新鲜胎牛全血，经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白成分的淡黄色透明上清液体，后经生产使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1µm终端微滤方法处理后。常用于细胞培养相关实验。

三、功能/作用

1）提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2）提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3）有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4）是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5）起酸碱度缓冲液作用。

6）提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害

四、如何避免胎牛血清使用时出现黑点？

1）尽可能地减少血清冻融次数。

2）培养基无需37℃水浴。

3）培养基保持pH值7.0-7.2。

4）严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。

5）掌握细胞传代的时机，细胞切勿生长过老。

五、如何避免胎牛血清中产生沉淀？

1）解冻血清时，清随时将之摇晃均匀。使温度及成分均一，减少沉淀产生。

2）血清分装冻存时，须规则摇晃均匀（小心造成气泡）使温度与成分均一。

3）勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

4）勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到破坏，从而影响血清品质。

5）血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

6）若必须做血清的热灭活，清遵守56℃，30min的原则，并且随时摇晃均匀，温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物增多。

六、血清中包含絮状沉淀物是什么？怎么处理？

沉淀包含的是纤维蛋白和脂蛋白，这属于正常特性，不会影响产品性质，要除去沉淀，需要离心血清（例：400g，1-2min）或者更简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶中（但我们一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为陈定会堵塞滤膜而无法过滤）在大多数情况下我们轻轻摇动陈地啊并加热至37℃就会在溶解。综上所诉使用产品时摇动并加热血清至37℃，沉淀就会消失。