单细胞测序,说是飞入寻常百姓家已经毫不夸张了,全网泛滥的数据足以说明这一点,如果你的研究里不带点单细胞测序的内容,是不是总感觉少了点什么?然而小伙伴们却常常为单细胞测序分析的入门感到头疼,而从今天起,壮观老师将从“过来人”的角色来带着大家梳理单细胞测序的理论与实践(大家可以点击进入我们之前分享的“生物信息学合集” ,为后续的学习奠定基础)。本期我们先来认识下单细胞测序的历史、作用和主要流程。 ![]() 1. 单细胞测序的起源 单细胞测序的故事可以追溯到上个世纪。最初,科学家们仅能进行均一细胞群体的基因分析,无法识别不同细胞之间的差异。然而,1990年代末,随着生物技术的快速发展,出现了一系列关键技术和方法,如PCR、流式细胞仪和微流控技术,这些技术为单细胞测序的发展奠定了基础。其中,PCR的发明对扩增单细胞的DNA和RNA起到了重要作用,为单细胞测序提供了前提。 1. 解析细胞多样性 单细胞测序为科研人员提供了深入了解细胞多样性和异质性的机会。在过去,研究中常常将细胞视为均质的实体,但现在,单细胞测序的帮助下,研究者能够更精确地划分不同亚型的细胞,揭示了不同细胞之间的功能和基因表达模式的差异。例如,单细胞测序已被广泛用于研究免疫系统中的不同T细胞亚型,从而有助于更好地理解免疫反应。 2. 揭示生物学机制 单细胞测序技术有助于深入了解细胞内的生物学机制。通过分析单个细胞的基因表达,研究者可以探究基因调控网络、信号通路和细胞间相互作用。这在癌症研究中尤为重要,因为单细胞测序能帮助识别癌细胞中的致癌突变和异常信号通路,为疾病治疗提供新思路。 3. 药物研发和个性化医疗 1. 样本采集和制备 单细胞测序的第一步是样本采集,这可能涉及组织保存、血液抽取或细胞培养。随后,样本需要被处理以获得单个细胞。这通常通过细胞分离、组织消化和细胞悬浮来实现。现在多数生物公司可以帮大家完成这一步! 2. RNA测序技术 单细胞RNA测序是单细胞测序的主要技术之一。它通过分析单个细胞的RNA,揭示了每个细胞的基因表达情况。最常用的平台是10X genomics,通过构建cDNA文库、测序和数据分析,可以得到单细胞的mRNA表达谱。 3. 数据分析和解释 单细胞测序生成大量数据,需要复杂的分析来解释。这包括数据清洗、细胞聚类、差异表达分析、细胞类型鉴定、功能富集分析、相互作用分析等步骤。单细胞常规分析的每一步,壮观老师都将带领大家学习! ![]() 期待已久~|临床科研与统计互助交流群来啦! (欢迎大家入群交流~ |
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