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2022-11-21 13:14胡俊峰胡俊峰 陈 涛 (三峡大学 医学院， 湖北 宜昌 443002) 仙鹤草俗名龙芽草、老鹤嘴、石打穿等，最初记载于《图经本草》，来源于蔷薇科植物龙芽草AgrimoniapilosaLedeb.的干燥地上部分，广泛分布于我国大部分地区，临床上应用较多[1]。药理研究表明，仙鹤草在抗肿瘤、抗氧化、降血糖等方面有着良好效果[2-3]，其中抗肿瘤作用相较于其他作用更为突出，临床上可用于治疗宫颈癌、肺癌、胰腺癌等多种肿瘤疾病，但较多用于肺癌的治疗[4]。 1 仙鹤草活性成分的提取近年来，通过对仙鹤草活性成分的研究，发现仙鹤草全草中含黄酮类化合物、间苯三酚衍生物、多糖、鞣质等化合物[5]。 1.1 黄酮类成分黄酮类化合物具有多种重要的药理活性，在抗氧化、抗肿瘤、降血脂等方面都有一定的应用[6]。黄酮类化合物的提取一般采用溶剂提取法、碱提酸沉法和炭粉吸附法。仙鹤草全草含有芦丁、仙鹤草内酯和芹菜素等多种黄酮。叶春林等[7]通过响应面法得出仙鹤草总黄酮最佳浸提工艺为提取时间100 min、提取温度100℃、料液比1∶15、乙醇浓度30%，浸提率达9.92%，相较于其他方法，此法提取得率较高。蒋志华等[8]采用响应面法得出在乙醇浓度为72%、料液比为1∶25、温度为60℃、提取时间为20 min的条件下为超声提取总黄酮的最佳工艺，得率为9.02%，采用此法操作较为简单，适于工艺生产。 1.2 间苯三酚衍生物据研究显示，仙鹤草中的间苯三酚衍生物(鹤草酚)具有良好的抗肿瘤作用和一定的细胞毒性[9]。姜晓姝等[10]采用正交试验得出当乙醇浓度为60%、料液比为1∶10、超声温度为70℃、超声时间为30 min时为超声提取鹤草酚的最佳工艺，具有快速、简便、提取率高的特点。姜涛等[11]通过正交实验得出当乙醇浓度为60%、提取温度为80℃、提取时间为1.5 h、料液比为1∶10、提取次数为2时为仙鹤草间苯三酚衍生物的最佳浸提工艺，最后采用两相萃取法及酸碱分离法进行分离纯化，本法具有纯度相对较高的优点。 1.3 多糖仙鹤草多糖具有良好的抗氧化活性，多糖的提取一般采用溶剂提取法。朱侃等[12]采用正交实验得出以蒸馏水为溶剂、提取时间为3 h、提取温度为90℃、料液比为1∶20时为最佳工艺，提取率达1.85%，工艺切实可行。宿婧等[13]通过响应面法得出仙鹤草多糖的微波辅助萃取的最佳工艺是微波功率400 W、时间111 s、温度87.3℃、提取率达4.54%、最后采用柱层析纯化可得高纯度多糖[14]，此法具有提取效率高，提取温度低等特点。 1.4 鞣质仙鹤草中亦含有鞣质，鞣质具有多种药理活性成分。孙希[15]采用超声提取法，利用70%的八倍量丙酮为提取剂，在25℃、功率为160 W时回流提取1 h，然后采用溶剂分离法，依次用一定量的乙醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇萃取3次即得，最后采用干酵素法和HPLC法进行含量测定，具有重复性高的优点。 2 仙鹤草抗肿瘤作用机制研究机体的细胞异常增殖是肿瘤发生发展的根本原因，肿瘤细胞的生成与凋亡比例是影响肿瘤生长的重要因素。中药由于其成分复杂，在分子机制方面表现出多途径、多层次、多方面的特性。近年来研究表明，仙鹤草在体内和体外都有良好的抗肿瘤作用，其在抗肿瘤方面的相关机制也越来越受关注。 2.1 抑制肿瘤血管生成肿瘤发展首要因素是血管新生，肿瘤细胞通过血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、血小板衍生因子(platelet derived growth factor，PDGF)、血管紧张素(angiotensin，ANG)以及环氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)的调节，诱导血管新生，进而摄取氧和营养物质，在体内生长、转移和扩散。抑制肿瘤血管生成，则可起到相应的抗肿瘤效果。针对仙鹤草活血化瘀的疗效，温雅[16]采用仙鹤草水提液作用A549细胞，经Real-time PCR检测后结果显示，仙鹤草水提液可下调肿瘤细胞中COX-2、VEGF的表达，拮抗血管生成，发挥抑制肿瘤细胞生长的作用。 2.2 抑制肿瘤细胞增殖恶性增殖与细胞凋亡失衡是肿瘤细胞发生的原因之一，在肿瘤细胞生长过程中发挥重要作用[17]。因此，抑制恶性增殖是抗肿瘤的重要防治手段。Teng 等[18]采用仙鹤草内酯(黄酮类)作用于人胃癌AGS细胞发现，仙鹤草内酯可通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases，MAPK)(ERK和p38)途径抑制细胞增殖。宛春雷等[19]采用精制后的仙鹤草鞣质成分作用于HepG2和BEL-7402肿瘤细胞，结果显示，作用72 h后两种肿瘤细胞的生长均受到明显抑制，并存在一定的浓度依赖性。蔡田恬等[20]采用不同浓度仙鹤草水提液作用于肺腺癌细胞BXPC-3和PANC-1，发现仙鹤草水提液可显著影响BXPC-3的细胞周期，通过抑制肺腺癌细胞的增殖，发挥抗肺腺癌作用。因此，仙鹤草可多途径抑制恶性肿瘤细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用。 2.3 诱导肿瘤细胞凋亡细胞凋亡在肿瘤发病中占有重要地位，凋亡抑制基因和凋亡活化基因异常表达可直接或间接影响肿瘤的发生与转移，加快肿瘤细胞凋亡是抗肿瘤的重要机制之一[21]。张婷婷等[22]发现，仙鹤草水提物能上调线粒体凋亡通路中的Bax、Caspase-3表达，诱导细胞凋亡，发挥抗肿瘤作用。张庆业等[23]采用仙鹤草含药血清作用于人肺癌细胞A549，观察其对细胞增殖、形态以及凋亡的影响，发现仙鹤草含药血清能促进细胞的早期凋亡和坏死，表现出一定的体外抗肿瘤作用。Yu等[24]采用GCFF(一种仙鹤草复方)作用于LoVo细胞，发现该复方可调节Bcl-2蛋白家族的表达从而诱导细胞凋亡，达到抗肿瘤的作用。Huang等[25]研究证实，仙鹤草多糖通过上调Bax表达，增加Bax/Bcl-2比值，进而显著抑制U-2 OS异种移植肿瘤的生长，并通过Caspase-3介导的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。所以，仙鹤草也可通过多种途径诱导肿瘤细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤作用。 2.4 免疫调节作用肿瘤的发生发展与机体免疫相互作用，免疫功能增强可有效维持内环境稳态，显著提高机体的抗肿瘤效应，发挥杀伤肿瘤细胞的作用。仙鹤草在一定程度上可提高机体免疫功能，直接或间接的增强机体对肿瘤的抵抗[26]。Wang等[27]用仙鹤草水提物作用于S180移植小鼠，结果表明仙鹤草能促进巨噬细胞的活性，增强移植小鼠的免疫功能，发挥抗肿瘤作用。范桢亮等[28]研究发现，环磷酰胺(cyclophosphamide，CP)免疫抑制模型小鼠的免疫功能与仙鹤草水煎液的给药浓度呈负相关。康林之等[29]发现，仙鹤草不同提取物也可影响小鼠免疫功能，但其机制还需进一步探讨。因此，仙鹤草对免疫功能的增强也可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。 3 仙鹤草的临床应用研究表明，肺癌的发生发展主要是津液亏虚或运行障碍所致[30]。仙鹤草是一味收敛止血、消肿生肌的良药，已开始应用于肺癌的相关治疗。由仙鹤草、干蟾片、人参等组成的鹤蟾片，具有解毒除痰、凉血祛瘀的功效。许永东等[31]将鹤蟾片作用于63例非小细胞肺癌患者，结果表明鹤蟾片能明显改善患者生活质量，对于非小细胞肺癌有着明显的治疗作用。益肺解毒汤(仙鹤草、天麦冬、太子参、制南星等)采用清热解毒、活血化瘀、益气养阴等方法组方，治疗肺癌取得较好的疗效[32]。方灿途等[33]研究发现，星夏涤痰饮联合化疗组患者生活质量明显优于单纯化疗患者。张超一[34]将加味三仙汤(仙鹤草、仙茅、仙灵脾等)作用于宫颈癌化疗患者发现，加味三仙汤无明显毒副反应，同时具有明显的增效减毒作用，患者状况得到明显改善。党民卿等[35]发现，仙鹤草单方或复方对胃癌、直肠癌等胃肠道肿瘤均有较好的肿瘤抑制作用，且加速瘤体消散。仙鹤草临床上多用于肺癌的治疗，但其相关机制目前仍不清楚，有待进一步研究[36]。 4 小结与展望目前大多数研究表明，仙鹤草发挥抗肿瘤作用主要是提取液中的相关成分可作用于肿瘤细胞和血管，直接杀伤相关肿瘤细胞，也可增强机体免疫力，达到间接抗肿瘤作用。临床上多用仙鹤草治疗肺癌相关疾病，降低了肿瘤的复发和转移，能显著提高患者生活质量，延长生存期。但对于仙鹤草中具体哪些单体发挥了相关抗肿瘤作用，以及其发挥抗肿瘤作用的具体机制，目前尚无明确结论，仍需深入研究，以探索开发相关中药制剂，更好地应用于临床。 |
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