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肠上皮细胞为抵御通过腔管进入身体的细菌、抗原和有毒物质提供了一个保护屏障。这些细胞受到调节，以分化和增殖来建立它们的保护功能。已有研究表明，位于上皮细胞下方的肠肌成纤维细胞在调节肠上皮细胞方面发挥作用。 永生化小鼠肠肌成纤维细胞是从C57BL/6J小鼠的结肠粘膜中分离出来的，并用SV40大T抗原转染。它保留了原始的肌成纤维细胞表型，并表达α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和Ⅰ型胶原。也检测到与免疫反应相关的蛋白，如TLR-4、CD14、MD2和IκBα。此外，这些细胞对脂多糖（LPS）处理有反应，能够引发炎症反应，导致IκBα降解和p38 MAPK磷酸化。它是研究肠损伤、纤维化、炎症、组织修复和肠组织免疫调节的宝贵工具。使用西方印迹（Western blot）和免疫荧光染色来确定细胞标记和蛋白表达。
货号：T0565 名称：永生化小鼠肠肌成纤维细胞 生物体：小鼠 (M. musculus) 组织：肠 供体历史：C57BL/6J 小鼠 生长特性：贴壁，纺锤形 细胞类型：永生化细胞 储存条件：液氮的气相，或低于-130°C 运输条件：干冰运输 产品格式：冷冻 预期用途：本产品仅用于实验室研究。不适用于任何动物或人类的治疗用途，任何人类或动物的消费，或任何诊断用途。 生物安全等级：II 分析证书：有关批次特定的测试结果，请参考可在 www.abmgood.com 查找的适用的分析证书。 生长条件：需要使用PriCoat™ T25烧瓶（G299）或应用细胞外基质（G422）以促进细胞对培养容器的粘附。PriGrow III (TM003) + 10% FBS + 1% 青霉素/链霉素溶液（G255），37.0°C，5% CO₂ 拆包和储存说明： 1. 目视检查包装容器是否有泄漏或破损的迹象。 2. 立即将干冰包装中的冷冻细胞转移到低于-130°C的温度中，Z好在液氮气相储存，直到准备使用。 为了确保Z高的活性水平，在收到后尽快解冻小瓶并开始培养。如果需要继续储存，小瓶应仅储存在低于-130°C或液氮气相中。不要在-70°C下储存，因为这会导致活性丧失。 永生化小鼠肠肌成纤维细胞解冻协议： 1. 在37°C水浴中快速摇晃解冻细胞（Z多2分钟）。瓶盖应保持在水面之上，以最小化污染风险。 2. 用70%乙醇喷洒并擦拭瓶身外部以消毒。从这一点开始，所有操作应严格在生物安全柜内使用无菌条件进行。 3. 将细胞悬液转移到含有5ml预加热的完全生长培养基的15ml无菌圆锥管中。以125xg离心细胞5-7分钟。 4. 在不干扰细胞沉淀物的情况下吸去上清液。将细胞沉淀物重新悬浮在推荐的预加热的完全生长培养基中，并分装到T25培养瓶中。 5. 在推荐的条件下培养细胞。 永生化小鼠肠肌成纤维细胞文献参考： Kawasaki, H., Ohama, T., Hori, M., & Sato, K. (2013). Establishment of mouse intestinal myofibroblast cell lines. World journal of gastroenterology, 19(17), 2629–2637. |
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